| 公開(公告)號 | CN1657632A |
| 公開(公告)日 | 2005.08.24 |
| 申請(專利)號 | CN200410061237.7 |
| 申請日期 | 2004.11.30 |
| 專利名稱 | 表達人類CYP2J2反義基因的重組腺相關病毒及其制備方法 |
| 主分類號 | C12N15/861 |
| 分類號 | C12N15/861;C12N15/53;A61K48/00;A61P35/00;C12N7/01 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 華中科技大學同濟醫(yī)學院附屬同濟醫(yī)院 |
| 發(fā)明(設計)人 | 汪道文;蔣建剛;肖嘯 |
| 地址 | 430030湖北省武漢市解放大道1095號轉同濟醫(yī)院內科汪道文 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 武漢開元專利代理有限責任公司 |
| 代理人 | 王和平 |
| 國省代碼 | 湖北;42 |
| 主權項 | 一種表達人類CYP2J2反義基因的重組腺相關病毒，其中該重組腺相關病毒包括的三種質粒：1)pXX2：為包裝質粒，含有編碼腺相關病毒Rep蛋白和Cap蛋白的編碼序列。并在上游和下游各插入一個p5啟動子，使表達效率可以提高15倍，提供rAAV復制所必須的Rep蛋白；2)pXXUF1：真核表達載體，含CMV啟動子，有較強的表達效率，其含有一多克隆NotI位點，可以連接不同的目的基因，pXXUF1反向連接人CYP表氧化酶基因，該載體含有rAAV轉基因表達所必須的末端重復序列(ITRs)，負責病毒的復制和病毒外殼的包被并攜帶目的基因；3)pXX6：為輔助質粒，刪除了腺病毒的致病基因序列，保留了腺病毒E1A、E2A和VA1RNA基因，所表達的蛋白質可發(fā)揮輔助作用以刺激rAAV基因的轉錄和翻譯，保證rAAV產(chǎn)量；4)以上三種質粒經(jīng)磷酸鈣沉淀法共轉染293細胞，即可在293細胞內形成高滴度的含目的基因的rAAV顆粒。 |
| 摘要 | 一種表達人類CYP2J2反義基因的重組腺相關病毒及其制備方法，本發(fā)明所提供的該重組腺相關病毒，是從人類CYP2J2 cDNA長1509bp，編碼含503個氨基酸的蛋白質，利用PCR法從人類白細胞DNA中克隆人類CYP2J2 cDNA，通過三種質粒磷酸鈣共轉染法包裝制備含反義目的基因的重組腺相關病毒并純化，制備的重組腺相關病毒轉染不同種類的人腫瘤細胞系，它能明顯抑制各種腫瘤細胞的增殖和遷移、促進腫瘤細胞的凋亡，抑制在體腫瘤瘤體的生長和轉移。因此，確定，CYP2J2的選擇性抑制劑和表達反義CYP2J2基因的重組腺相關病毒是腫瘤治療的潛在藥物。 |
| 國際公布 |
