| 公開(公告)號 | CN1316042C |
| 公開(公告)日 | 2007.05.16 |
| 申請(專利)號 | CN200510031487.0 |
| 申請日期 | 2005.04.26 |
| 專利名稱 | 基因mRNA的定量檢測系統(tǒng)和檢測方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 湖南大學 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 王柯敏;譚蔚泓;劉 斌;李 軍;王 煒 |
| 地址 | 410082湖南省長沙市河西岳麓山湖南大學化學生物傳感與計量學國家重點實驗室 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 湖南兆弘專利事務所 |
| 代理人 | 趙 洪 |
| 國省代碼 | 湖南;43 |
| 主權(quán)項 | 一種基因mRNA表達定量檢測方法，其特征在于基因表達定量檢測的步驟為：(1).構(gòu)建分子信標與RNA標準品雜交的熒光標準曲線：利用T7體外轉(zhuǎn)錄試劑盒通過體外轉(zhuǎn)錄技術(shù)合成與分子信標探針互補的靶RNA分子，取過量的分子信標與不同濃度的靶RNA分子在雜交緩沖液中混合，在37℃溫育4～6小時，檢測并記錄雜交前后熒光強度的變化，以體外合成的靶RNA濃度為橫坐標，以分子信標與RNA雜交后的熒光信號變化值為縱坐標作圖，建立RNA濃度與熒光信號變化的雜交標準曲線；(2).提取不同材料的總RNA并定量測定后，在10mM Tris-HCl，pH 8.0，3mM MgCl2雜交緩沖液中加入濃度為25nM的分子信標、一定量樣品總RNA，在37℃溫育，檢測并記錄熒光強度的變化；(3).利用建立的雜交熒光標準曲線，計算出與雜交后的熒光信號變化值對應的靶RNA濃度，以每微克樣品含靶RNA的摩爾數(shù)表示。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種基因mRNA表達水平定量檢測的分析技術(shù)。該檢測系統(tǒng)由標準品RNA，分子信標核酸探針和RNA檢測樣品在相應的雜交緩沖溶液中組成。本檢測技術(shù)能定量檢測經(jīng)基因轉(zhuǎn)染、藥物處理、基因干擾等各種處理的細胞或組織樣品的基因表達水平，在生命科學與醫(yī)學研究領(lǐng)域具有重要的科學實用價值和廣闊的市場前景。 |
| 國際公布 |
