| 公開(公告)號 | CN100338227C |
| 公開(公告)日 | 2007.09.19 |
| 申請(專利)號 | CN200510049601.2 |
| 申請日期 | 2005.04.20 |
| 專利名稱 | 實時定量PCR技術(shù)檢測人21號染色體數(shù)目的方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 呂時銘;朱宇寧;裘 儉;朱 波;尤建飛 |
| 地址 | 310006浙江省杭州市學(xué)士路2號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 |
| 代理人 | 張法高;趙杭麗 |
| 國省代碼 | 浙江;33 |
| 主權(quán)項 | 用于實時定量PCR技術(shù)檢測人21號染色體數(shù)目的試劑盒，含有多重?zé)晒舛縋CR反應(yīng)液、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品材料，其特征是：在多重?zé)晒舛縋CR反應(yīng)液中含有兩對引物和相應(yīng)的Taqman熒光探針、熱啟動DNA聚合酶及反應(yīng)緩沖液、dNTP、MgCl2、熒光染料ROX，其中一對引物及探針擴增及檢測21號染色體上DSCR4基因的部分非多態(tài)性片段，為目標(biāo)分子標(biāo)記，另一對引物及探針擴增及檢測1號染色體上RABIF基因的部分片段，為內(nèi)參分子標(biāo)記，其中：(1)目標(biāo)分子標(biāo)記序列為：GTTGATGGGCTTGCGCTTATCTGCTTGTCCCTTCTCCCATCTGATTTCTTGTGGAGCCCATGG上游引物序列：5’-GTTGATGGGCTTGCGCTTAT-3’下游引物序列：5’-CCATGGGCTCCACAAGAAAT-3’Taqman探針序列：5’-Fam-TGCTTGTCCCTTCTCCCATCT-Tamra-3’(2)內(nèi)參分子標(biāo)記序列為：TCAACATGGGCCCCACATGGTCCTAGTTTCCCCGGCTCATTATGCTTCAGGCACACTGGCTTTCTTGC上游引物序列：5’-TCAACATGGGCCCCACAT-3’下游引物序列：5’-GCCAGTGTGCCTGAAGCA-3’Taqman探針序列：5’-Vic-TCCTAGTTTCCCCGGCTCATT-Tamra-3’。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供檢測人21號染色體數(shù)目的方法，是應(yīng)用基因組特異性單拷貝序列作為染色體的分子標(biāo)記，在21號染色體的唐氏綜合征關(guān)鍵區(qū)域選擇DSCR4基因的部分非多態(tài)性片段為目標(biāo)分子標(biāo)記，在1號染色體上不易發(fā)生缺失或三體的區(qū)域選擇RABIF基因的部分片段為內(nèi)參分子標(biāo)記。設(shè)計兩對引物及相應(yīng)的Taqman探針，采用多重實時定量PCR技術(shù)同管擴增這兩個序列，通過反映相對量的delta ct值來確定21號染色體的數(shù)目并由此診斷21三體綜合征。本發(fā)明將染色體的數(shù)目分析轉(zhuǎn)化為分子信號檢測，充分利用分子定量的優(yōu)勢，不僅方法簡便、高度敏感、穩(wěn)定和檢測率高，而且還具有高通量和自動化的特點，在臨床有極好的應(yīng)用前景。 |
| 國際公布 |
