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表達(dá)禽流感病毒H5亞型HA蛋白的重組新城疫LaSota弱毒疫苗株

公開(公告)號(hào) CN1298845C  
公開(公告)日 2007.02.07  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510097996.3  
申請(qǐng)日期 2005.09.02  
專利名稱 表達(dá)禽流感病毒H5亞型HA蛋白的重組新城疫LaSota弱毒疫苗株  
主分類號(hào) C12N7/01(2006.01)I  
分類號(hào) C12N7/01(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;A61K39/12(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 步志高;陳化蘭  
地址 150001黑龍江省哈爾濱市市南崗區(qū)馬端街427號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司  
代理人 程金山  
國(guó)省代碼 黑龍江;23  
主權(quán)項(xiàng) 一種生產(chǎn)表達(dá)編碼野生型或突變型禽流感病毒H5亞型血凝素(HA)蛋白的基因的重組新城疫LaSota弱毒疫苗株的方法,該方法包括: (1)構(gòu)建轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒,其中所述轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒是pBRN-FL-H5wtHA或pBRN-FL-H5mutHA,其核苷酸序列分別如圖11和13所示; (2)構(gòu)建轉(zhuǎn)錄輔助質(zhì)粒,其中所述轉(zhuǎn)錄輔助質(zhì)粒包括如下三個(gè)質(zhì)粒:包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的核蛋白(NP)的cDNA序列的質(zhì)粒、包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的磷酸蛋白(P)的cDNA序列的質(zhì)粒、和包括編碼所述新城疫LaSota弱毒疫苗株的大聚合酶蛋白(L)的cDNA序列的質(zhì)粒; (3)將所述轉(zhuǎn)錄質(zhì)粒和轉(zhuǎn)錄輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染所述病毒復(fù)制許可的宿主細(xì)胞,培養(yǎng)轉(zhuǎn)染后的宿主細(xì)胞; (4)收獲上清液,過濾后繼續(xù)敏感細(xì)胞傳代或接種雞胚尿囊腔救獲重組病毒株, 其中所述宿主細(xì)胞是穩(wěn)定表達(dá)T7聚合酶的細(xì)胞系。  
摘要 本發(fā)明涉及一種表達(dá)野生型或突變型禽流感病毒H5亞型血凝素(HA)蛋白的重組新城疫LaSota弱毒疫苗株,更具體地,重組新城疫LaSota弱毒疫苗株是rLasota-H5wtHA和rLasota-H5mutHA。本發(fā)明還公開了制備所述重組新城疫LaSota弱毒疫苗株的方法和該重組新城疫LaSota弱毒疫苗株在制備預(yù)防禽流感的疫苗中的應(yīng)用。  
國(guó)際公布  
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