| 公開(公告)號 | CN1948473A |
| 公開(公告)日 | 2007.04.18 |
| 申請(專利)號 | CN200510030396.5 |
| 申請日期 | 2005.10.11 |
| 專利名稱 | 從胰渣中提取及純化胰蛋白酶的方法 |
| 主分類號 | C12N9/76(2006.01)I |
| 分類號 | C12N9/76(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 江蘇萬邦生化醫(yī)藥股份有限公司;上海復(fù)星醫(yī)藥（集團)股份有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 吳世斌;曹韞旭;王偉剛;宋惠蓉;楊 樺 |
| 地址 | 221002江蘇省徐州市中山南路113號海云大廈17、18層 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 上海東亞專利商標(biāo)代理有限公司 |
| 代理人 | 董 梅;孔德力 |
| 國省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權(quán)項 | 一種從胰渣中提取及純化胰蛋白酶的方法，包括如下步驟： (a)用無機酸從胰渣中抽提胰蛋白酶； (b)調(diào)整含有胰蛋白酶的抽提液的pH至6.0-8.0，Ca2+激活； (c)調(diào)節(jié)上述(b)中的上清的pH至3.0-4.0，經(jīng)陽離子交換層析收集含有胰蛋白酶的洗脫液； (d)上述(c)收集的含有胰蛋白酶的洗脫液與對胰蛋白酶有特異性親和力的介質(zhì)接觸，洗去未結(jié)合的蛋白質(zhì)，用解離胰蛋白酶的洗脫液洗脫結(jié)合的胰蛋白酶，收集洗脫液即得純化的胰蛋白酶。 |
| 摘要 | 本發(fā)明從胰渣中提取及純化胰蛋白酶的方法涉及酶學(xué)、及其分離或純化方法技術(shù)領(lǐng)域。公開了一種從胰渣中提取和純化胰蛋白酶的方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的胰酶激活程序復(fù)雜、純化過程中有機溶劑污染環(huán)境的技術(shù)缺陷。本發(fā)明提取和純化胰蛋白酶的方法包括用無機酸從胰渣中抽提胰蛋白酶；抽提液調(diào)整pH至6.0-8.0，用Ca2+激活；調(diào)節(jié)上清的pH至3.0-4.0，經(jīng)陽離子交換層析收集含有胰蛋白酶活性的洗脫液；用親和層析進一步純化即得純化的胰蛋白酶。本發(fā)明的收率達1.2g胰蛋白酶/Kg胰渣，比活性大于10000U/mg蛋白質(zhì)。激活胰酶的操作簡單，整個純化過程中未使用任何有機溶劑因而減少了環(huán)境污染。 |
| 國際公布 |
