| 公開(公告)號(hào) | CN1317298C |
| 公開(公告)日 | 2007.05.23 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200510036856.5 |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.08.30 |
| 專利名稱 | 中藥決明子蛋白質(zhì)的提取方法和應(yīng)用 |
| 主分類號(hào) | C07K14/415(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C07K14/415(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;A61K36/482(2006.01)I;A61K38/02(2006.01)I;A61P3/06(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 華南師范大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 李楚華;李續(xù)娥;郭寶江 |
| 地址 | 510630廣東省廣州市天河區(qū)石牌 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 廣州粵高專利代理有限公司 |
| 代理人 | 何淑珍 |
| 國(guó)省代碼 | 廣東;44 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種中藥決明子蛋白質(zhì)的提取方法，其特征在于包括如下步驟： (1)決明子粗蛋白的提取，包括： ——在4-8℃條件下，將決明子碾碎后用石油醚或環(huán)己烷浸泡脫脂24-48小時(shí)，分2-4次進(jìn)行； ——回收溶劑，殘?jiān)?g：10ml-1g：50ml的體積浸泡于50mmol pH為8.0的KH2PO4-NaOH中8-12小時(shí)，重復(fù)3-5次，合并提取液； ——提取液離心20-30min，取上清液；上清液邊攪拌邊加入硫酸銨至45％-55％的飽和度，離心分離，保留沉淀；沉淀物在分子量3,000-8,000的透析袋中進(jìn)行脫鹽； ——冷凍干燥儀中-20℃至-80℃溫度下進(jìn)行冷凍干燥，得到粉末狀決明子粗蛋白，-20℃冷藏備用： (2)決明子粗蛋白的提純，包括： ——將上述方法得到的粉末狀決明子粗蛋白充分溶解于15mmol-25mmol pH為7.0-8.0的Tris-HCl的緩沖液中； ——用分子篩層析柱進(jìn)行初步純化，分子篩層析柱上樣前先用含有0.15-0.3mol NaCl的上述緩沖液平衡2-5倍柱體積；每次上樣量為180μl-240μl，監(jiān)測(cè)波長(zhǎng)為280nm，流速為0.3-0.7ml/min；決明子粗蛋白經(jīng)分子篩層析被分成5個(gè)峰：分別為peak1、peak2、peak3、peak4和peak5； (3)決明子蛋白質(zhì)peak2的分離純化，包括：用離子交換柱純化peak2，離子交換柱按照A液與B液依次交替的程序平衡，A液為15mmol-25mmol pH為7.0-8.0的Tris-HCl，B液為含有1.0mol NaCl的A液；將peak2濃縮、脫鹽，上樣量為25mg-50mg/ml；柱子用0-1.0mol的NaCl梯度、15mmol-25mmol pH為7.0-8.0的Tris-HCl的緩沖液進(jìn)行洗脫，流速為0.8-1.5ml/min；peak2經(jīng)離子交換柱層析被分成3個(gè)峰，分別為：peak I、peak II和peak III，收集peakIII。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及分子量為19680的中藥決明子蛋白質(zhì)的提取方法，包括：決明子粗蛋白的提取；決明子粗蛋白的提純；決明子蛋白質(zhì)peak2的分離純化；得到的蛋白質(zhì)能顯著抑制細(xì)胞內(nèi)膽固醇的合成，具有明顯的降脂作用；本發(fā)明還涉及所述中藥決明子蛋白質(zhì)在制備降脂藥物中的應(yīng)用。 |
| 國(guó)際公布 |
