| 公開(公告)號(hào) | CN1320120C |
| 公開(公告)日 | 2007.06.06 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200510037759.8 |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.01.31 |
| 專利名稱 | 制備轉(zhuǎn)基因家蠶的方法及其制藥用途 |
| 主分類號(hào) | C12N15/85(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N15/85(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I;A01K67/04(2006.01)I;A61K35/64(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 蘇州大學(xué);西南農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 貢成良;曹廣力;薛仁宇;何 澤;魏育紅;朱越雄;沈衛(wèi)德;夏慶友;周澤揚(yáng);向仲懷 |
| 地址 | 215006江蘇省蘇州市滄浪區(qū)十梓街1號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 蘇州創(chuàng)元專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 |
| 代理人 | 陶海鋒 |
| 國省代碼 | 江蘇;32 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種制備帶有人粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子基因(hGM-CSF)的轉(zhuǎn)基因家蠶的方法，其特征在于：通過基因工程操作將家蠶核型多角體病毒(BmNPV)的IE-1基因啟動(dòng)子控制下的hGM-CSF基因克隆進(jìn)以轉(zhuǎn)座子piggyBAC因子為基礎(chǔ)的帶有報(bào)告基因的載體，構(gòu)建重組轉(zhuǎn)基因載體，在輔助質(zhì)粒作用下，用精子介導(dǎo)法獲得帶有報(bào)告基因的家蠶，檢測到hGM-CSF基因的為熒光蠶，G0代熒光蠶與正常蠶交配后代為G1代，G1代同一蛾圈孵化后單獨(dú)飼養(yǎng)，用便攜式熒光燈結(jié)合熒光倒置顯微鏡檢測G1代家蠶幼蟲，結(jié)合PCR檢測，將既有明顯熒光顯示，又能PCR檢測到hGM-CSF基因的同一蛾圈孵化后飼養(yǎng)的G1代轉(zhuǎn)基因家蠶進(jìn)行雜交育種，獲得G2代，用以上從G1代獲得G2代的方法，將G2代育種制備為G3代，對(duì)G2、G3代同樣進(jìn)行熒光檢測和PCR檢測，保留從G2代到G3代不發(fā)生性狀分離的G3代，對(duì)保留的G3代的同一蛾圈蠶種與正常蠶進(jìn)行單對(duì)雜交，同一蛾圈蠶種的雜交后代如果均不發(fā)生性狀分離時(shí)，該蛾圈蠶種即為所需轉(zhuǎn)基因家蠶。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種制備帶有人粒細(xì)胞－巨噬細(xì)胞集落刺激因子的轉(zhuǎn)基因家蠶的方法，通過基因工程操作將家蠶核型多角體病毒基因啟動(dòng)子控制下的人粒細(xì)胞－巨噬細(xì)胞集落刺激因子基因克隆進(jìn)以轉(zhuǎn)座子piggyBAC因子為基礎(chǔ)的帶有報(bào)告基因的載體，構(gòu)建重組轉(zhuǎn)基因載體，在軸助質(zhì)粒作用下，用精子介導(dǎo)法獲得帶有報(bào)告基因的家蠶，并檢測到人粒細(xì)胞－巨噬細(xì)胞集落刺激因子基因，育種制成所述轉(zhuǎn)基因家蠶。利用該轉(zhuǎn)基因家蠶的幼蟲或蛹或蛾經(jīng)冷凍干燥后可獲得生白細(xì)胞藥物。本發(fā)明方法實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)基因家蠶制備生白細(xì)胞藥物，生產(chǎn)成本低，不涉及具有潛在危害的病毒基因組，安全性高，藥物效果尤其是口服效果良好，具有十分重大的實(shí)施價(jià)值。 |
| 國際公布 |
