方法名稱： |
貫葉連翹及提取物-金絲桃苷的含量測定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于貫葉連翹及提取物中金絲桃苷的含量測定 |
方法原理： |
本品細(xì)粉加甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜分離，在360 nm處測定峰面積，外標(biāo)法計算含量 |
儀器設(shè)備及實驗條件： |
儀器 美國Agilent 1100 型高效液相色譜儀（含四元梯度泵、在線真空脫氣機、自動進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測器、ChemStation色譜工作站) 色譜條件 色譜柱：依利特Kromasil C18（ 4. 6 mm×200 mm，5 μm)；流動相：甲醇-0. 5%磷酸（ 45：55，v/v，用三乙胺調(diào)pH至3. 0)；流速：1. 0 mL/min；檢測波長：360 nm；柱溫：35 ℃ |
試樣制備： |
對照品溶液的制備 精密稱取金絲桃苷對照品4. 93 mg，置5 mL棕色量瓶中，加甲醇超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻制得0. 986 mg/mL對照品貯備液。從中精密量取200 μL加甲醇稀釋至1 mL棕色量瓶，制成0. 1972 mg/mL對照品溶液。 供試品溶液的制備 1)原藥材供試品溶液的制備：取貫葉連翹藥材粉碎，過80目篩，混勻，稱取28 mg，精密稱定，置5 mL量瓶中，加適量甲醇，超聲處理30 min溶解，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，以5000 r/min離心5 min，取上清液經(jīng)0. 20 μm PTFE濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得。2)提取物供試品溶液的制備：稱取貫葉連翹提取物15 mg，精密稱定，置10 mL棕色量瓶中，加適量甲醇，超聲處理30 min溶解，加甲醇稀釋至刻度，經(jīng)0. 20 μm PTFE 濾膜過濾，取續(xù)濾液，即得提取物供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取金絲桃苷對照液以及貫葉連翹及提取物供試品溶液適量，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定峰面積。以外標(biāo)法計算金絲桃苷含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
張俊松，王曉利，羅謙，等. HPLC測定貫葉連翹及提取物中偽金絲桃素和金絲桃苷的含量. 中成藥.2006，28（5)：709~712 |
