方法名稱： |
貫葉連翹及提取物-金絲桃苷的含量測(cè)定-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于貫葉連翹及提取物中金絲桃苷的含量測(cè)定 |
方法原理： |
本品細(xì)粉加甲醇超聲提取，經(jīng)液相色譜分離，在360 nm處測(cè)定峰面積，外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器 美國(guó)Agilent 1100 型高效液相色譜儀（含四元梯度泵、在線真空脫氣機(jī)、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱、二極管陣列檢測(cè)器、ChemStation色譜工作站) 色譜條件 色譜柱：依利特Kromasil C18（ 4. 6 mm×200 mm，5 μm)；流動(dòng)相：甲醇-0. 5%磷酸（ 45：55，v/v，用三乙胺調(diào)pH至3. 0)；流速：1. 0 mL/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：360 nm；柱溫：35 ℃ |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取金絲桃苷對(duì)照品4. 93 mg，置5 mL棕色量瓶中，加甲醇超聲溶解并稀釋至刻度，搖勻制得0. 986 mg/mL對(duì)照品貯備液。從中精密量取200 μL加甲醇稀釋至1 mL棕色量瓶，制成0. 1972 mg/mL對(duì)照品溶液。 供試品溶液的制備 1)原藥材供試品溶液的制備：取貫葉連翹藥材粉碎，過(guò)80目篩，混勻，稱取28 mg，精密稱定，置5 mL量瓶中，加適量甲醇，超聲處理30 min溶解，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，以5000 r/min離心5 min，取上清液經(jīng)0. 20 μm PTFE濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液，即得。2)提取物供試品溶液的制備：稱取貫葉連翹提取物15 mg，精密稱定，置10 mL棕色量瓶中，加適量甲醇，超聲處理30 min溶解，加甲醇稀釋至刻度，經(jīng)0. 20 μm PTFE 濾膜過(guò)濾，取續(xù)濾液，即得提取物供試品溶液。 |
操作步驟： |
分別精密吸取金絲桃苷對(duì)照液以及貫葉連翹及提取物供試品溶液適量，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算金絲桃苷含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
張俊松，王曉利，羅謙，等. HPLC測(cè)定貫葉連翹及提取物中偽金絲桃素和金絲桃苷的含量. 中成藥.2006，28（5)：709~712 |
