方法名稱: |
貫葉連翹- 貫葉金絲桃素的含量測(cè)-RP-HPLC-UV |
應(yīng)用范圍: |
用于貫葉連翹的貫葉金絲桃素的含量測(cè)定 |
方法原理: |
本品烘干后加甲醇超聲提取,經(jīng)液相色譜分離,在272 nm處測(cè)定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件: |
儀器 高效液相色譜儀:Waters 510 泵,UV - VIS 檢測(cè)儀(Waters 2487),Rheodyne 7725I 進(jìn)樣閥 色譜條件 色譜柱:HypersiL- ODS反相柱(大連依利特公司,250 mm×4.6 mm);流動(dòng)相:乙腈:NaH2PO4 - H3PO4 緩沖液(0.1M,pH2.50)90∶10(V/ V,%);流速:1.0 mL/min;柱溫:24 ℃;檢測(cè)波長(zhǎng):272 nm;進(jìn)樣量:20 μL |
試樣制備: |
對(duì)照品溶液的制備 精密稱取貫葉金絲桃素對(duì)照3.8 mg置10 mL容量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,得對(duì)照品溶液,低溫避光備用,用時(shí)適當(dāng)稀釋。 供試品溶液的制備 將采集的貫葉連翹藥材分兩組處理:甲組取頂端25cm,乙組取地上全植株,在40 ℃烘箱內(nèi)烘干后,用粉碎機(jī)中粉碎,每份樣品稱取5.0 g,加入甲醇30 mL進(jìn)行超聲提取,共提取3次,每次40 min,用0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾,定容為100 mL,稀釋10倍后即得。 |
操作步驟: |
分別精密吸取貫葉金絲桃素對(duì)照液以及貫葉連翹供試品溶液各10 μL,注入液相色譜儀,按上述色譜條件測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算貫葉金絲桃素含量。 |
附件: |
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備注: |
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參考文獻(xiàn): |
鄭清明,秦路平,鄭漢臣等. 不同產(chǎn)地貫葉連翹中貫葉金絲桃素含量分析比較. 藥學(xué)實(shí)踐雜志.2002,20(1):29~31 |