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人工蟲草--麥角甾醇的含量測(cè)定方法--HPLC法

  
方法名稱:
  人工蟲草--麥角甾醇的含量測(cè)定--HPLC法
應(yīng)用范圍:
  測(cè)定人工蟲草中麥角甾醇的含量
方法原理:
 樣品以加飽和KOH回流皂化,用環(huán)己烷提取,提取液經(jīng)硅藻土、硅膠H柱凈化,經(jīng)液相色譜儀分離,在282nm測(cè)定峰面積,標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定的麥角甾醇含量。
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器設(shè)備  Shimadzu 高效液相色譜儀,SPD210A 紫外檢測(cè)器,LC-10AD高壓泵,DGU-4A 脫氣機(jī),CT0210A 恒溫箱,C-R6A記錄儀;

 色譜條件 色譜柱:Irreguler C18 (250nm×4.6mm,10μm);檢測(cè)波長(zhǎng):282nm,流動(dòng)相:甲醇;流速:1.3mL/min;檢測(cè)器靈敏度:0.04 AUFS,記錄儀紙速:2mm/min ;柱溫:29℃。
試樣制備:
 

標(biāo)準(zhǔn)曲線  精密稱取麥角甾醇對(duì)照品5.70mg用無(wú)水乙醇溶解,定量至25 ml,得228.0g/mL的貯備液。從貯備液中分別精密吸取0.20.8,1.6,2.44.2 mL,用無(wú)水乙醇稀釋至5mL。按色譜條件進(jìn)樣20進(jìn)μL ,以峰面積對(duì)麥角甾醇的濃度行回歸,即得。

供試品溶液的制備  精密稱取蟲草粉(過80目篩)約0.1g,加飽和KOH 溶液0.5mL,無(wú)水乙醇5mL,水浴中回流皂化1 h ,冷卻,用環(huán)己烷提取3次,每次5mL。提取液先經(jīng)硅藻土-水柱除去少量乙醇和水溶性雜質(zhì),再經(jīng)硅膠H柱保留麥角甾醇,棄去環(huán)己烷,加5mL無(wú)水乙醇洗脫麥角甾醇,即得。
操作步驟:
  按色譜條件進(jìn)樣20μL,記錄色譜峰面積,用標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算其含量。
附件:
  點(diǎn)擊下載 (解壓密碼:zxtf.net.cn)
備注:
 
參考文獻(xiàn):
  段韶軍,張忠鵬,李菲菲等.高效液相色譜法測(cè)定人工蟲草中麥角甾醇的含量.山西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào).2006,37(6):611-612
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