明目地黃丸－熊果酸的測定－薄層掃描法2

本方法采用薄層掃描法測定明目地黃丸中熊果酸的含量。

本方法適用于明目地黃丸中熊果酸含量的測定。

供試品于索氏提取器中經(jīng)乙醚加熱回流，過濾，濾液蒸干，殘?jiān)�用無水乙醇－氯仿溶解，制成供試液，點(diǎn)樣、展開，以10%硫酸乙醇溶液顯色，用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，于波長λs=540nm， λ_R=700nm測量熊果酸（C₃₀H₄₈O₃)吸收度積分值，計(jì)算其含量。

1. 乙醚

2 .石油醚

3 .無水乙醇

4 .氯仿

5 環(huán)己烷

6 .醋酸乙酯

7 .冰醋酸

8 .乙醇

9 .硫酸 10％硫酸乙醇溶液

1 儀器

1.1索氏提取器

1.2薄層掃描儀

1.3涂布器

應(yīng)能使吸附劑在玻璃板上手工或自動(dòng)涂成一層符合厚度要求的均勻薄層。

1.4點(diǎn)樣器

一般采用微升毛細(xì)管或與之相應(yīng)的點(diǎn)樣器材。

1.5展開室

可用適合薄層板大小的專用玻璃缸，底部平底或雙槽，蓋子須密閉。

2 材料

2.1玻板

用10cm×10cm、10cm×15cm、20cm×10cm或20cm×20cm的規(guī)格，要求光滑、平整，洗凈后不附水珠，晾干。

2.2吸附劑

硅膠G，其顆粒大小一般要求直徑為10～40μm。

1. 對照品溶液的制備

精密稱取熊果酸對照品適量，加無水乙醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取供試品水蜜丸或小蜜丸，切碎，精密稱取水蜜丸約 10g或小蜜丸 約18g，或取大蜜丸，剪碎，混勻，精密稱取約18g，加水50mL，放置使溶散，濾過，藥渣用水80mL洗滌，在室溫干燥至呈松軟的粉末狀，在100℃烘干，連同濾紙一并置索氏提取器中，加乙醚適量，加熱回流提取4 小時(shí)，提取液回收乙醚至干，殘?jiān)�用石油醚�?0～60℃)浸泡2次，每次20mL（浸泡約2分鐘)，傾去石油醚，殘?jiān)�加無水乙醇－氧仿（3： 2)的混合液適量，微熱使溶解，轉(zhuǎn)移至 5mL量瓶中，加上述混合液至刻度，搖勻，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1. 薄層板制備

將吸附劑1份和水3份在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的氣泡后，倒入涂布器中，在玻板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布（厚度為0.25～0.5mm)取下涂好薄層的玻板，于室溫下，置水平臺上晾干，在反射光及透射光下檢視，表面應(yīng)均勻，平整，無麻點(diǎn)、無氣泡、無破損及污染，于110℃烘30分鐘，冷卻后立即使用或置干燥箱中備用，或用商品預(yù)制板。

2. 點(diǎn)樣

精密吸取供試品溶液 5μL、對照品溶液 2μL與 5μL，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，如用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣到薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊1.0～1.5cm，樣點(diǎn)直徑一般不大于2mm，點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜。點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。

3. 展開

將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開缸的展開劑中，以環(huán)己烷－氯仿－醋酸乙酯－冰醋酸（20：5：8：0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加熱4～5分鐘，至斑點(diǎn)顯色清晰，取出。

4. 含量測定

在薄層板上覆蓋同樣大小的玻璃板，周圍用膠布固定，選擇反射方式，采用吸收法，進(jìn)行掃描，波長：λs=540nm， λ_R=700nm， 測量供試品吸收度積分值與對照品吸收度積分值，計(jì)算。

用外標(biāo)法測定時(shí)，若對照品各數(shù)據(jù)點(diǎn)在校正曲線上呈一通過原點(diǎn)的直線時(shí)，可用一點(diǎn)法校正，如不通過原點(diǎn)通常宜采用二點(diǎn)法校正，必要時(shí)用多點(diǎn)法校正。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編、化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部p.492。