方法名稱： |
新清寧片—大黃素的測(cè)定—薄層掃描色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用薄層掃描色譜法測(cè)定新清寧片中大黃素的含量。 本方法適用于由熟大黃等幾味中藥制成的新清寧片。 |
方法原理： |
供試品粉末加甲醇適量置索氏提取器中提取至無色，甲醇溶液蒸干，殘?jiān)酉←}酸30ml 、氯仿30ml 置水浴上加熱回流1h ，再用氯仿提取3次，每次30ml，氯仿提取液蒸干，殘?jiān)勇确?甲醇(1∶1) 混合溶劑溶解，定量轉(zhuǎn)移至10ml 量瓶中，并稀釋至刻度,搖勻，點(diǎn)于硅膠G薄層板上，以苯-醋酸乙酯-冰醋酸（15:5:0.3)為展開劑，展開，展距8.0cm，取出，涼干，置薄層掃描儀中，以雙波長(zhǎng)ls=445nm，lR=550nm反射鋸齒掃描，測(cè)定大黃素的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1. 甲醇，苯，醋酸乙醋等（均為分析純) 2. 大黃素（購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所) |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 薄層掃描色譜儀 1.2 自動(dòng)點(diǎn)樣儀 1.3 電子天平 2 實(shí)驗(yàn)條件 2.1 展開劑：苯 醋酸乙酯 冰醋酸=15 5 0.3，展距：8cm 2.3 薄層板：硅膠G薄層板 2.4 掃描波長(zhǎng)：測(cè)定波長(zhǎng)ls=445nm，參比波長(zhǎng)lR=550nm。 |
試樣制備： |
1. 稱取供試品 取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)（過65目篩)，精密稱取藥粉0.8g。 2. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取大黃素對(duì)照品適量，用甲醇溶解制成濃度為0.3mg/ml，作為對(duì)照品溶液。 3. 供試品溶液的制備 供試品粉末加甲醇適量置索氏提取器中提取至無色，甲醇溶液蒸干，殘?jiān)酉←}酸30ml 、氯仿30ml 置水浴上加熱回流1h ，再用氯仿提取3次，每次30ml，氯仿提取液蒸干，殘?jiān)勇确?甲醇(1∶1) 混合溶劑溶解，定量轉(zhuǎn)移至10ml 量瓶中，并稀釋至刻度,搖勻，作為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 分別精密吸取上述對(duì)照液1 、2 、3 、4 、5、6μl，在同一硅膠G薄層板上進(jìn)行帶狀點(diǎn)樣，依法展開，掃描測(cè)定大黃素的吸收度值，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對(duì)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測(cè)定 精密吸取上述供試品溶液10μL點(diǎn)于硅膠G薄層板上，方法同上，用雙波長(zhǎng)掃描法測(cè)定大黃素的吸收度值，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
王仁英. 雙波長(zhǎng)薄層掃描法測(cè)定首烏片大黃素含量. 安徽中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2000，19(2)：40-42. |
