新清寧片—大黃酚的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定新清寧片中大黃酚的含量。

本方法適用于由熟大黃等幾味中藥制成的新清寧片。

供試品置100mL磨口具塞三角瓶中，精密加入甲醇50mL，冷浸24h，過濾，精密吸取上述濾液10mL，置50mL具塞試管中，于水浴上蒸干甲醇，加水5mL，冰浴冷卻后，加乙醚20mL，鹽酸0.5mL，密閉振搖5min，精密量取上層乙醚液10mL，置另一具塞試管中，溫水中蒸干乙醚，再加入甲醇5mL使殘?jiān)�溶解，用微孔濾膜（0.45μm)過濾，精密吸取續(xù)濾液10μL，注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器檢測大黃酚的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 乙醚（分析純)

3. 大黃酚（購自中國藥品生物制品檢定所)

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Discovery C₁₈柱（250mm×4.6mm，5μm)。

1.3 紫外檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水=80 20（含0.1%的高氯酸)

2.2 柱溫：室溫

2.3 檢測波長：254 nm

2.4 流速：1.0mL/min

1. 稱取供試品

取本品20片，除去包衣，精密稱定，研細(xì)（過65目篩)，精密稱取藥粉0.5g。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取大黃酚對照品適量，用甲醇溶解制成濃度為0.05mg/ml，作為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

供試品置100mL磨口具塞三角瓶中,，精密加入甲醇50mL，冷浸24h，過濾，精密吸取上述濾液10mL，置50mL具塞試管中，于水浴上蒸干甲醇，加水5mL，冰浴冷卻后，加乙醚20mL，鹽酸0.5mL，密閉振搖5min，精密量取上層乙醚液10mL，置另一具塞試管中，溫水中蒸干乙醚，再加入甲醇5mL使殘?jiān)�溶解，用微孔濾膜（0.45μm)過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別精密吸取上述對照液2 、4 、6 、8、10、20μl進(jìn)樣，用紫外檢測器測定大黃酚的吸收度值，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

.2 供試品的測定

精密吸取上述供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀，用紫外檢測器測定大黃酚的吸收度值，計(jì)算出其含量。

周寶寬，張其婉 . HPLC 測定莫家清寧丸中大黃酚的含量. 中藥新藥與臨床藥理，2000，11(5):301-303.