三黃片—黃芩苷的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定三黃片中黃芩苷的含量。

本方法適用于由由大黃、鹽酸小檗堿和黃芩浸膏等組成的片劑。

供試品除糖衣，精密稱定，加乙醇進(jìn)行超聲處理，超聲后溶液定容進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)315nm處檢測(cè)黃芩苷的吸收值，計(jì)算出其含量。

1. 甲醇（色譜純)

2. 乙醇 （分析純)

3. 磷酸（分析純)

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

Phenomenex luna C₈柱（150×4.6mm，5μm)。

1.3 紫外吸收檢測(cè)器

2 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：甲醇 水 磷酸=45 55 0.2

2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：315nm

2.3柱溫：22℃

1. 稱取供試品

取樣品20片，除去糖衣，精密稱定。研細(xì)，混勻，取約0.1g，精密稱定。

2. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取黃芩苷對(duì)照品5mg，置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，混勻，即得（每1ml含黃芩苷約0.1mg)。

3.供試品溶液的制備

將精密稱定的樣品置100ml量瓶中, 加70%乙醇至刻度,搖勻后超聲處理20min, 放冷, 靜置, 取上清液用0.45um濾膜過濾后供HPLC進(jìn)樣。

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

精密量取上述對(duì)照品溶液1，2，3，4，5，6ml，分別置25ml容量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,進(jìn)樣10μl測(cè)定,以黃芩苷的進(jìn)樣量(μg) 為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),得回歸方程

2. 供試品的測(cè)定

精密吸取供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)315nm處測(cè)定黃芩苷的吸收值，計(jì)算出其含量。

蔡為群, 顧雪中.高效液相色譜法測(cè)定三黃片中黃芩苷的含量.時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2003，14（3)：136-137

吳海菁. HPLC法測(cè)定三黃片中黃芩苷的含量.海峽藥學(xué)，2003，15（2)：34-36