黃連上清丸—鹽酸小檗堿的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定黃連上清丸中鹽酸小檗堿的含量。

本方法適用于中成藥黃連上清丸。

將供試品加甲醇鹽酸加熱，超聲提取，提取液加甲醇過濾，濾液作為供試品液。精密吸取對照品溶液和供試品液，分別注入液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長265nm處檢測大黃酸吸收值，以外標法計算含量。

1. 乙腈（色譜純)

2. 0.1mol/L磷酸二氫鈉溶液

3. 0.025mol/L十二烷基硫酸鈉溶液

4. 鹽酸

5. 甲醇

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

YWG - C₁₈ 柱 (250 × 4.6mm，5µm)

1.3 紫外吸收檢測器

2 色譜條件

2.1 流動相：

乙腈 0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液 0.025mol/L十二烷基硫酸鈉溶液 = 50 25 25

2.2 流速：1.3mL/min

2.3 檢測波長：265nm

2.4 柱溫：室溫

1. 稱取供試品

精密稱取本品粉末0.5g。

2. 對照品溶液的制備

精密稱定鹽酸小檗堿對照品適量，加鹽酸-甲醇(1:100)溶液溶解并制成每1mL含鹽酸小檗堿0.04mg的對照品溶液。

3. 標準溶液的制備

精密稱取鹽酸小檗堿對照品0.0109g，置100mL量瓶中，加鹽酸-甲醇(1:100)混合溶液溶解并定容，搖勻。精密量取此溶液2mL置5mL量瓶中，加鹽酸-甲醇(1:100)混合溶液稀釋至刻度，搖勻，作為繪制標準曲線的系列濃度標準溶液。

4.供試品溶液的制備

將供試品置具塞錐形瓶中，精密加人鹽酸-甲醇(1:100)混合溶液25mL，稱定重量，置50°C水浴中加熱15min，放冷，超聲處理30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

1.標準曲線的繪制

精密吸取上述標準溶液1、5、10、15、20、25µL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長265nm處測定鹽酸小檗堿的吸收值，以標準溶液進樣量對峰面積繪制標準曲線方程，進行線性回歸，得到回歸方程。

2.供試品的測定

精密吸取對照品溶液和供試品液各10µL，分別注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長265nm處測定鹽酸小檗堿的吸收值，以外標法計算出其含量。

黃萍，羅鳳琴. HPLC測定黃連上清丸中鹽酸小檗堿的含量. 華西藥學雜志，2003，18(2)：139-140.