益心酮滴丸—黃酮苷的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定益心酮滴丸中黃酮苷的含量。

本方法適用于中成藥益心酮滴丸。

供試品于容量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，稀釋，濾過(guò)，濾液注入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)330nm處檢測(cè)牡荊素鼠李糖苷(SZ-1)，牡荊素葡萄糖苷(SZ-2)的吸收值，分別計(jì)算含量。

1.甲醇（色譜純)

2.乙腈（色譜純)

3.四氫呋喃

4.冰醋酸

1儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

Agilent ZORBAX Extend-C₁₈(4.6mm×250mm,5μm)

1.3紫外吸收檢測(cè)器

2色譜條件

2.1流動(dòng)相：四氫呋喃 ＋ 甲醇 乙腈 ＋ 水 ＋ 醋酸 = 30 3 4 120 3

2.2檢測(cè)波長(zhǎng)：330nm

2.3流速：1.0mL/min

2.4柱溫：25℃

1.稱取供試品

精密稱取益心酮滴丸20粒。

2.對(duì)照品溶液的制備

精密稱取對(duì)照品牡荊素鼠李糖苷4.0mg，置100mL容量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得0.04mg/mL的牡荊素鼠李糖苷對(duì)照品溶液；精密稱取對(duì)照品牡荊素葡萄糖苷2.0mg，置100mL容量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得0.02mg/mL的牡荊素鼠葡萄糖苷對(duì)照品溶液。

3.供試品溶液的制備

將供試品置于100mL容量瓶中，加50%甲醇適量，待溶解后，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取10mL，置于50mL量瓶中加50%甲醇稀釋至刻度，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

精密吸取五個(gè)不同濃度的牡荊素鼠李糖苷和牡荊素葡萄糖苷對(duì)照品溶液各10μL，注入高效液相色譜儀，以峰面積積分值分別對(duì)牡荊素鼠李糖苷和牡荊素葡萄糖苷的濃度進(jìn)行回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.供試品溶液的測(cè)定

精密吸取上述供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)330nm處分別測(cè)定牡荊素鼠李糖苷和牡荊素葡萄糖苷的峰面積積分值，用外標(biāo)法計(jì)算出牡荊素鼠李糖苷和牡荊素葡萄糖苷的含量。

蘇娟，張衛(wèi)東，周耘，等.HPLC測(cè)定益心酮滴丸中的黃酮苷.中國(guó)中藥雜志，2004，29(6):525-527