方法名稱(chēng)： |
復(fù)方丹參片—丹參酮ⅡA的測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方丹參片中丹參酮ⅡA的含量。 本方法適用于中藥制劑復(fù)方丹參片。 |
方法原理： |
供試品于錐形瓶中，加95%乙醇浸泡，超聲處理，過(guò)濾，濾液水浴蒸干，殘?jiān)?5%乙醇溶解，離心，上清液進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)460nm處檢測(cè)丹參酮ⅡA的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
試劑： |
1. 甲醇（色譜純) 2. 乙醇 3. 醋酸 4. 醋酸銨 |
儀器設(shè)備： |
1. 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 Shimpack CLC-ODS色譜柱（150×6.0mm，5μm)。 1.3 紫外吸收檢測(cè)器 2. 色譜條件 2.1 流動(dòng)相：0.2mol/L醋酸銨溶液 甲醇 = 1 5 2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：460nm 2.3柱溫：35℃ |
試樣制備： |
1. 稱(chēng)取供試品 精密稱(chēng)取本品2片去糖衣后研細(xì)的藥粉（過(guò)5號(hào)篩，80目)。 2. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱(chēng)取丹參酮ⅡA對(duì)照品2mg，置10mL量瓶中，用二氯甲烷溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密吸取此溶液1.0mL，置10mL量瓶中，用二氯甲烷溶解并稀釋至刻度，搖勻，得每1mL含丹參酮ⅡA20μg的對(duì)照品溶液。 3.供試品溶液的制備 取供試品置15mL具塞試管中，加入95%乙醇10mL浸泡，超聲振蕩10min，過(guò)濾，同法浸提3次，合并3次的濾液。濾液置水浴蒸干，殘?jiān)?5%乙醇溶解定容至5mL，于12000r/min離心5min，上清液濾過(guò)，濾液為供試品溶液。 注：“精密稱(chēng)取”系指稱(chēng)取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制 精密吸取上述對(duì)照品溶液不同量注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)460nm處測(cè)定丹參酮ⅡA的吸收值，以進(jìn)樣量對(duì)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。 2. 供試品的測(cè)定 精密吸取供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測(cè)器，于波長(zhǎng)460nm處測(cè)定丹參酮ⅡA的吸收值，計(jì)算出其含量。 |
參考文獻(xiàn)： |
蔣學(xué)華，許啟榮，羅娟等. 高效液相色譜法測(cè)定復(fù)方丹參片中丹參酮ⅡA的含量. 華西藥學(xué)雜志，1996，11（2)：102-104. |
