方法名稱： |
普魯卡因青霉素—普魯卡因和青霉素的測(cè)定—高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測(cè)定普魯卡因青霉素中普魯卡因(C13H20N2O2)和青霉素(C16H18N2O4)的含量。 本方法適用于普魯卡因青霉素中普魯卡因和青霉素的含量測(cè)定。 |
方法原理： |
取本品適量，用流動(dòng)相溶解并定量稀釋，注入液相色譜儀，在235nm波長(zhǎng)處檢測(cè)，記錄色譜圖。另分別取普魯卡因?qū)φ掌泛颓嗝顾貙?duì)照品各適量，流動(dòng)相定量稀釋，同法測(cè)定，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。 |
試劑： |
1. 乙腈 2. 40%氫氧化四丁基銨溶液 3. 10%的稀磷酸溶液 4. 1mol/L氫氧化鉀溶液 5. 磷酸二氫鉀 |
儀器設(shè)備： |
1. 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱 十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。 1.3 紫外吸收檢測(cè)器 2. 色譜條件 2.1 流動(dòng)相：緩沖液（取磷酸二氫鉀14g和40%氫氧化四丁基銨溶液6.5g溶解于700mL水中，用1mol/L氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值至7.0，再加水稀釋至1000mL，搖勻)＋水 乙腈=52 23 25（用1mol/L氫氧化鉀溶液或10%的稀磷酸溶液調(diào)節(jié)pH值至7.5±0.05) 2.2 檢測(cè)波長(zhǎng)：235nm 2.3 柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1. 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取普魯卡因?qū)φ掌泛颓嗝顾貙?duì)照品適量，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1mL中分別含青霉素0.8mg和普魯卡因0.54mg的溶液，搖勻，即為對(duì)照品溶液。 2. 供試品溶液的制備 取本品70mg，精密稱定，置50mL量瓶中，加流動(dòng)相約30mL，超聲使溶解后，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
操作步驟： |
分別精密量取供試品及對(duì)照品溶液10μL注入液相色譜儀，在235nm波長(zhǎng)處檢測(cè)，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，即得。 |
參考文獻(xiàn)： |
中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，二部，p.791-792。 |
