注射用環(huán)磷酰胺－環(huán)磷酰胺－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定注射用環(huán)磷酰胺中環(huán)磷酰胺的含量。

本方法適用于注射用環(huán)磷酰胺。

1. 乙腈

2. 乙醇

3. 對羥基苯甲酸乙酯

1.儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按環(huán)磷酰胺峰計算應(yīng)不低于2000。

1.3 紫外吸收檢測器

2.色譜條件

2.1 流動相：乙腈 水=36 65

2.2 檢測波長：195nm

2.3 柱溫：室溫

1. 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

精密稱取對羥基苯甲酸乙酯36mg，置200mL量瓶中，加乙醇2mL使溶解，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即為內(nèi)標(biāo)溶液。

2. 對照品溶液的制備

精密稱取環(huán)磷酰胺對照品約25mg，置50mL量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液5mL，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即為對照品溶液。

3. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品裝量差異項下的內(nèi)容物約25mg，置50mL量瓶中，加內(nèi)標(biāo)溶液5mL，用流動相稀釋至刻度，搖勻，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各20mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長195nm處測定環(huán)磷酰胺（C₇H₁₅Cl₂N₂O₂P)的峰面積，計算出其含量。

中華人民共和國藥典，國家藥典委員會編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005版，二部，p.308。