生物化學(xué)實驗教學(xué)大綱（54學(xué)時)
課程總學(xué)時數(shù)： 54 實驗學(xué)時數(shù) 54
面向?qū)I(yè)（層次)： 藥學(xué)院、生科院和中藥學(xué)院
應(yīng)開實驗項目： 6 個（至少包括一個綜合實驗和一個設(shè)計性實驗)
應(yīng)開實驗時間： 三 年級 第一 學(xué)期
實驗類別： 專業(yè)基礎(chǔ)
一、實驗教學(xué)目標(biāo)與基本要求
生物化學(xué)是藥學(xué)專業(yè)的重要專業(yè)基礎(chǔ)課，而實驗教學(xué)是培養(yǎng)藥學(xué)人材的一個重要方面，在整個教學(xué)計劃中占有較大的比重，也是當(dāng)前本科教學(xué)中急需加強的一個環(huán)節(jié)。本課程旨在培養(yǎng)學(xué)生的儀器操作能力、實驗動手能力和良好的科研作風(fēng)，并培養(yǎng)學(xué)生實事求是的科學(xué)態(tài)度、良好的科學(xué)素質(zhì)和工作習(xí)慣。為藥物的研制、開發(fā)和生產(chǎn)培養(yǎng)后備力量。該課程實驗內(nèi)容包括三個部分，即基礎(chǔ)生化實驗、用于藥物研究的生化技術(shù)實驗和藥物作用的生化分析實驗。實驗類型包括驗證性實驗、綜合性實驗、演示性實驗和設(shè)計性實驗。每個實驗均包含目的要求、實驗原理、實驗材料、實驗方法及實驗指導(dǎo)，涉及凝膠電泳、凝膠層析、生物活性物質(zhì)的分離純化和鑒定等實驗技能訓(xùn)練。通過實驗，加深學(xué)生對生物化學(xué)基本理論與概念的理解，增強運用所學(xué)理論解決實際問題的能力。
基本要求：
1、 通過實驗驗證理論課中有關(guān)的生化基礎(chǔ)理論；
2、 熟練掌握生化實驗常用的基本方法、技術(shù)原理和應(yīng)用；
3、 了解現(xiàn)代生化實驗新技術(shù)的原理和應(yīng)用；
4、 能運用所學(xué)的理論和實驗知識設(shè)計相關(guān)的實驗研究方案。
二、實驗教材及實驗指導(dǎo)書：
教材：《生物化學(xué)》吳梧桐主編，衛(wèi)生部規(guī)劃教材第五版（供藥學(xué)專業(yè)用)
主要參考書：《生物化學(xué)實驗與指導(dǎo)》 韋平和 主編， 中國醫(yī)藥科技出版社。
三、實驗課程內(nèi)容與學(xué)時分配
| 序號 | 實驗項目名稱 | 內(nèi) 容 及 要 求 | 實驗學(xué)時 | 備注 | |
| 1 | 蛋白質(zhì)和酶的性質(zhì) | 1．蛋白質(zhì)的性質(zhì)（顏色反應(yīng)， 沉淀反應(yīng)) 2．酶的性質(zhì)（酶的特異性， 外界因素對酶活性的影響：溫度，pH，激活劑和抑制劑) 3．驗證所學(xué)的有關(guān)蛋白質(zhì)性質(zhì)的理論知識 執(zhí)業(yè)護(hù)士網(wǎng)4．加深對酶性質(zhì)的認(rèn)識 5．掌握氨基酸和蛋白質(zhì)常用的定性，定量分析的方法和原理 6．掌握檢查酶性質(zhì)的方法及其原理，酶的特異性 | 驗證 | 7 | |
| 2 | 凝膠層析法 （第一次) | 1．掌握分子篩凝膠層析法的工作原理 2．了解使用凝膠介質(zhì)分離純化蛋白樣品的方法和基本操作技術(shù) | 綜合 | 6 | |
| 蛋白質(zhì)定量測定 （第二次) | 1． 了解Folin-酚試劑法的操作技術(shù) 2． 掌握Folin-酚試劑法測定蛋白質(zhì)含量的原理和方法 3． 掌握分光光度法，包括確定最大吸收波長，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，準(zhǔn)確測定未知樣品，正確使用測定儀器等 | 6 | |||
| 凝膠電泳技術(shù) （第三次) | 1． 垂直板狀SDS-PAGE電泳分析蛋白的純度及分子量 2． 掌握垂直板狀SDS-PAGE電泳的基本原理 3． 了解垂直板狀SDS-PAGE電泳的基本操作，包括制膠、灌膠、加樣、電泳、剝膠、染色及脫色等 | 7 | |||
| 3 | 動物組織中核酸的提取 （第一次) | 1．從豬肝中提取DNA和RNA 2．掌握用鹽溶液從動物組織提取核酸的原理和操作技術(shù) | 綜合 | 14 | |
| 核酸的鑒定與含量測定 （第二次) | 1． 掌握核酸常用的定性，定量分析的原理和方法 2． 掌握分光光度法定量核酸的方法 | ||||
| 4 | 觀察四氯化碳中毒性肝炎血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活力變化 | 1．測定正常動物血清與四氯化碳中毒動物血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活力變化 2．了解四氯化碳對動物的肝毒性 3．了解藥物損害肝臟后血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力的變化 4．掌握血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力的測定方法 | 驗證 | 8 | |
| 5 | 血清總膽固醇及甘油三酯的測定 | 1．用比色法測定血清中總膽固醇和甘油三酯的含量 2．了解測定血清總膽固醇及甘油三酯的實際意義 3．掌握比色測定血清總膽固醇和甘油三酯的原理及方法 | 驗證 | 7 | |
| 6 | 底物濃度對酶活性的影響 | 1. 測定蔗糖酶的米氏常數(shù)，觀察底物濃度對酶活性的影響 2. 了解酶促反應(yīng)動力學(xué)研究的范圍 3. 掌握測定米氏常數(shù)的原理和方法 | 驗證 | 7 | |
| 7 | 蛋白、核酸的區(qū)分鑒定及特性常數(shù)測定 | 1． 能運用所學(xué)知識區(qū)分蛋白核酸樣品 2． 設(shè)計蛋白核酸純度測定的方法 3． 設(shè)計蛋白質(zhì)分子量等電點等特性常數(shù)的測定方法 | 設(shè)計 | 8 | |
| 8 | 多糖樣品的純化，含量測定及特性常數(shù)的測定 | 1． 設(shè)計運用凝膠層析法純化多糖樣品 2． 運用蒽酮法測定多糖樣品的含量 3． 設(shè)計方法分析該多糖樣品的分子量及單糖組成 4． 設(shè)計方法分析該多糖樣品的基本結(jié)構(gòu) | 設(shè)計 | 8 | |
| 9 | 質(zhì)粒DNA的抽提及瓊脂糖電泳 | 1． 了解小量堿法抽提質(zhì)粒DNA的原理和方法 2． 學(xué)習(xí)分子生物學(xué)的基本實驗操作 3． 學(xué)習(xí)水平瓊脂糖電泳分離核酸的方法 | 演示 | 2 | 多媒體演示 |
