臨床免疫學(xué)及檢驗授課教案-理論課教案:免疫細胞分離與檢測

課程名稱

臨床免疫學(xué)檢驗

授課題目（章節(jié)或主題)

免疫細胞的分離與檢測

授課教師

王慧

所屬二級學(xué)院

第一臨床學(xué)院

所屬教研室

檢驗系臨床免疫

職稱

講師

授課時間

2006 年10月 16 日第7 周星期一 第6-7 節(jié)第1 次課

授課時數(shù)

2學(xué)時

授課班級

  醫(yī)學(xué)  檢驗 專業(yè)（本科√□ �？啤�)   2003   級 1、2、3  班

教學(xué)課型

理論課√□ 實驗課□ 習(xí)題課□ 討論課□ 實習(xí)（踐)課□  其它□

教材名稱、作者、出版社及出版時間

<臨床免疫學(xué)檢驗>，呂世靜主編，中國醫(yī)藥科技出版社，2004年

教學(xué)目標(biāo)與要求：

1、  掌握內(nèi)容：外周血單個核細胞分離的原理及操作要點，淋巴細胞的純化與亞群分離，T細胞的特異性抗原的檢測，T細胞增殖試驗，B細胞功能的檢測(溶血空斑試驗、酶聯(lián)免疫斑點法)。

2、  熟悉內(nèi)容：吞噬細胞的分離，細胞的保存技術(shù)胸、細胞活力測定，T、B細胞數(shù)量的檢測，T細胞介導(dǎo)的細胞毒試驗，T細胞體內(nèi)試驗，B細胞功能的檢測(體內(nèi)試驗、增殖試驗)

3、了解內(nèi)容：NK細胞功能的檢測，吞噬細胞功能檢測

主要知識點、重點與難點：

主要知識點：

一、免疫細胞的分離與純化：采用何種分離方法，應(yīng)根據(jù)實驗的目的及所需細胞的種類、純度及數(shù)量等要求來確定。

1、  白細胞的分離:自然沉降法，聚合物加速沉淀法

2、  外周血單個核細胞 的分離：Ficoll、Percoll分層液法

3、  淋巴細胞的純化：紅細胞的去除，血小板的去除，單核細胞和粒細胞的去除(粘附貼壁法，吸附柱過濾法、羰基鐵粉吞噬法)

4、 淋巴細胞亞群的分離：E花環(huán)分離法，尼龍棉柱分離法，親和板結(jié)合分離法，免疫磁珠分離法

5、  吞噬細胞的分離和收集

6、  淋巴細胞的保存

二、T細胞數(shù)量的檢測：T細胞表面主要CD抗原的檢測(間接免疫熒光法，酶免疫組織化學(xué)法， 微量細胞毒試驗， 花環(huán)技術(shù))

三、B細胞數(shù)量的檢測：mIg的檢測，CD抗原檢測，F(xiàn)c受體和補體受體的檢測，小鼠紅細胞受體的檢測

四、T細胞功能的檢測：T細胞增殖試驗(形態(tài)法，同位素計數(shù)法，MTT比色法)，T細胞介導(dǎo)的細胞毒試驗，體內(nèi)試驗

五、B細胞功能的檢測：體內(nèi)試驗，B細胞增殖試驗，溶血空斑試驗，酶聯(lián)免疫斑點法

二、重點：

1 、 免疫細胞分離及檢測的原理；

2 、 免疫細胞活力的檢測及保存

3、 細胞增殖試驗

三、難點：

1、密度梯度離心法的原理

2、溶血空斑試驗

教學(xué)方法（請打√選擇)：

講授法□√　 討論法□ 　演示法□　 自學(xué)輔導(dǎo)法□　 　練習(xí)法(習(xí)題或操作) 　讀書指導(dǎo)法□

ＰＢＬ（以問題為中心的教學(xué)法)□√　　案例法□　 其他□

教學(xué)媒體（請打√選擇)：

教材□√ 板書□√ 實物□  標(biāo)本□  掛圖□ 模型□ 投影□√ 幻燈□   錄像□   CAI（計算機輔助教學(xué))□

教學(xué)過程設(shè)計（包括講授內(nèi)容、講授方法、時間分配、媒體選用、板書設(shè)計等)：

1、概述 (3分鐘)

免疫細胞檢驗-反應(yīng)機體細胞免疫功能 ，免疫細胞的分類（圖示)。

2、第一節(jié)  免疫細胞的分離與純化（掌握)（35min)

（一)白細胞的分離（圖示+講授法－一般講授)

（二)外周血單個核細胞的分離（圖示+講授法－重點講授)

（三)淋巴細胞的純化與亞群分離（講授法－重點講授)

（四)吞噬細胞的分離（講授法－一般講授)

3、第二節(jié)  淋巴細胞數(shù)量檢測（熟悉)(16min)

（一)T細胞數(shù)量檢測（講授法－重點講授)

（二)B細胞數(shù)量檢測（講授法－重點講授)

4、第三節(jié)  淋巴細胞功能檢測（熟悉)(20min)

（一)T細胞功能檢測（圖示+講授法zxtf.net.cn/wsj/－重點講授)

（二)B細胞功能檢測（講授法－重點講授)

（三)NK細胞功能檢測（講授法－一般講授)

5、第四節(jié)  吞噬細胞功能檢測（自學(xué))

（一)中性粒細胞功能檢測

（二)巨噬細胞功能檢測

6、總結(jié)概括本堂內(nèi)容

提問、課堂討論等師生互動的設(shè)計：

1、  什么是免疫細胞？（顯示電鏡圖片，吸引學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣)

2、  免疫細胞的功能？

3、  為什么要進行免疫細胞的分離？

4、  為什么分離外周血單個核細胞的最佳密度為1.077±0.001？

教學(xué)小結(jié)、復(fù)習(xí)思考及作業(yè)題布置：

歸納、概括本堂學(xué)習(xí)的重點，布置課后思考題

1、試述外周血單個核細胞的分離方法？

2、試述T、B細胞數(shù)量檢測技術(shù)類型？

3、試述T、B細胞功能檢測技術(shù)原理與類型？

教學(xué)中的創(chuàng)新點（加強基礎(chǔ)與臨床聯(lián)系、外語運用、啟發(fā)學(xué)生思維、指導(dǎo)學(xué)生自學(xué)、介紹學(xué)科新進展等方面)：

1、課程一開始采用幾種電鏡圖片引起學(xué)生學(xué)習(xí)的興趣

2、所有專業(yè)名詞均用英文標(biāo)注，并在講授過程中用英文念出該專業(yè)名詞。

3、第四節(jié)課內(nèi)容安排學(xué)生進行自習(xí)，培養(yǎng)學(xué)生自學(xué)的能力。

參考資料（包括輔助教材、參考書、文獻等)：

《臨床免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗》人衛(wèi)出版社 第三版 王蘭蘭主編 

《免疫學(xué)和免疫學(xué)檢驗》人民衛(wèi)生出版社 第二版 陶義訓(xùn)主編

《微生物學(xué)及微生物學(xué)檢驗》  唐珊熙 主編  2002年人衛(wèi)出版社

教研室

意 見

教研室主任簽章： 年　　月　　日

教學(xué)后記（即教學(xué)實施情況總結(jié)分析，在課程結(jié)束后填寫)