分光光度計(jì)的類型很多,最常用的是可見(jiàn)分光光度計(jì)和紫外-可見(jiàn)光分光光度計(jì)。各種類型的分光光度計(jì)的結(jié)構(gòu)和原理基本相同,一般包括光源、單色器、比色杯、檢測(cè)器和顯示器五大部分。
一、光源
光源指一種可以發(fā)射出供溶液或吸收物質(zhì)選擇性吸收的光。光源應(yīng)在一定光譜區(qū)域內(nèi)發(fā)射出連續(xù)光譜,并有足夠的強(qiáng)度和良好的穩(wěn)定性,在整個(gè)光譜區(qū)域內(nèi)光的強(qiáng)度不應(yīng)隨波長(zhǎng)有明顯的變化。實(shí)際上許多光源的強(qiáng)度都隨波長(zhǎng)變化而變化。為了解決這一問(wèn)題,在分光光度計(jì)內(nèi)裝有光強(qiáng)度補(bǔ)償裝置,使不同波長(zhǎng)下的光強(qiáng)度達(dá)到一致?梢(jiàn)光分光光度計(jì)常用光源是鎢燈,能發(fā)射出350nm ~2500n m 波長(zhǎng)范圍的連續(xù)光譜,適用范圍是360nm ~1000n m 。現(xiàn)在常用光源是鹵鎢燈, 其特點(diǎn)是發(fā)光效率大大提高,燈的使用壽命也大大延長(zhǎng)。
紫外光光度計(jì)常用氫燈作為光源,其發(fā)射波長(zhǎng)的范圍為150nm ~400n m 。因?yàn)椴A兆贤夤舛⒉晃兆贤夤,因而氫燈燈殼用石英制成。為了使光源穩(wěn)定,分光光度計(jì)均配有穩(wěn)壓裝置。
二、單色器
將來(lái)自光源的復(fù)合光分散為單色光的裝置稱為分光系統(tǒng)或單色器。單色器可分成濾光片、棱鏡和光柵。濾光片能讓某一波長(zhǎng)的光透過(guò),而其它波長(zhǎng)的光被吸收,濾光片可分成吸收濾光片、截止濾光片、復(fù)合濾光片和干涉濾光片。棱鏡是用玻璃或石英材料制成的一種分光裝置,其原理是利用光從一種介質(zhì)進(jìn)入另一種介質(zhì)時(shí),光的波長(zhǎng)不同在棱鏡內(nèi)的傳播速度不同,其折射率不同而將不同波長(zhǎng)的光分開(kāi),玻璃棱鏡色散能力大,分光性能好,能吸收紫外線而用于可見(jiàn)光分光光度計(jì),石英棱鏡可用于可見(jiàn)光和紫外光分光光度計(jì)。光柵是分光光度計(jì)常用的一種分光裝置,其特點(diǎn)是波長(zhǎng)范圍寬,可用于紫外、可見(jiàn)和近紅外光區(qū),而且分光能力強(qiáng),光譜中各譜線的寬度均勻一致。
三、比色杯
比色杯又稱為吸收池或比色皿。比色杯常用無(wú)色透明、耐腐蝕和耐酸堿的玻璃或石英材料做成,用于盛放待比色溶液的一種裝置。玻璃比色杯用于可見(jiàn)光區(qū),而石英比色杯用于紫外光區(qū),比色杯的光徑0.1 ~10cm ,一般為1cm 。同一臺(tái)分光光度計(jì)上的比色杯,其透光度應(yīng)一致, 在同一波長(zhǎng)和相同溶液下, 比色杯間的透光度誤差應(yīng)小于0.5 %。使用時(shí)應(yīng)對(duì)比色杯進(jìn)行校準(zhǔn)。
四、檢測(cè)器
檢測(cè)器是將透過(guò)溶液的光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào),并將電信號(hào)放大的裝置。常用的檢測(cè)器為光電管和光電倍增管。
五、顯示器
顯示器是將光電管或光電倍增管放大的電流通過(guò)儀表顯示出來(lái)的裝置。常用的顯示器有檢流計(jì)、微安表、記錄器和數(shù)字顯示器。檢流計(jì)和微安表可顯示透光度(T %) 和吸光度(A)。數(shù)字顯示器可顯示T %、A 和C (濃度)。