八、其他細(xì)菌的快速檢查方法
對軍團桿菌、布氏桿菌、土拉桿菌、產(chǎn)氣夾膜桿菌等的快速診斷，效果良好。
九、鉤端螺旋體的檢查法
�。�1)根據(jù)當(dāng)?shù)劂^端螺旋體的型別制備多價抗體、標(biāo)記FITC制成熒光抗體。
�。�2)檢查方法：
①血液標(biāo)本的檢查：取發(fā)熱期的病人或發(fā)病動物的血液約2ml，制取血漿，并加入鉀明礬（0.058g/ml)，振蕩混勻后置室溫10～15min，然后中速離心沉淀，取沉渣涂片，晾干，95%酒精固定。免疫熒光染色，鏡檢。
�、谀蛞簶�(biāo)本檢查：取病人或動物尿液約2～3ml，高速離心，取沉渣涂片，無水乙醇固定，免疫熒光染色，鏡檢。
③臟器標(biāo)本的檢查：取發(fā)病動物的腎臟皮質(zhì)部分，以刀片切出整齊斷面，濾紙吸去血液，再以潔凈載玻片壓印制片，晾干后以丙酮在4℃固定。經(jīng)10%甲醛固定的組織可作冰凍切片，依丙酮-乙醇-甲醇的次序固定，熒光抗體染色前以3%表面活性劑如Tween20處理切片，據(jù)稱，這樣可使熒光強度增加4倍。
�、芘囵B(yǎng)液檢查：同尿處理。
�、萏禺愋钥贵w的檢查：用適當(dāng)血清型的鉤端螺旋體作抗原，用間接法檢查病人血清中的特異性抗體，可用于流行病學(xué)調(diào)查和臨床追溯診斷。此檢查適用于人類和家畜等。
本法診斷鉤端螺旋體，一般只具有屬的特異性，鑒定抗體則可能達(dá)到型的特異性。
十、梅毒螺旋體的檢查法
免疫熒光細(xì)胞化學(xué)應(yīng)用于梅毒血清學(xué)診斷有很多文獻(xiàn)報道。70年代應(yīng)用PAP法又將敏感性提高了許多倍，此法已作為梅毒診斷的常規(guī)方法。用間接免疫熒光法可PAP法，取已知梅毒螺旋體作抗原，檢查病人血清中的特異性抗體。
（一)抗原制備
以標(biāo)準(zhǔn)株（如Nicol株)梅毒螺旋體感染家兔睪丸，約1周后待睪丸產(chǎn)生明顯炎癥，剖腹將睪丸摘除，仔細(xì)清除精索、附睪和包膜，然后以滅菌器械將其剪成薄片，置于燒瓶內(nèi)，加入20ml生理鹽水，振蕩30min，使螺旋體逸出，2000r/min離心10min以除去組織碎塊和血細(xì)胞，將上清高速離心（10,000r/min)30min，去上清，沉淀以5ml生理鹽水洗滌，再高速離心，洗滌，反復(fù)3次以上，以盡可能除去組織成分和家兔球蛋白，最后以pH7.2PBS(內(nèi)含0.01%硫柳汞或數(shù)滴福爾馬林以防腐)將沉淀制成敏感毫升約含10，000，000螺旋體的懸液，置4℃保存?zhèn)溆�。有效期約半年。醫(yī).學(xué).全.在.線網(wǎng)站zxtf.net.cn
�。ǘ�)熒光抗體
用抗人IgG和IgM熒光抗體。為診斷新生兒先天性梅毒，必須用抗人IgM熒光抗體。
所有稀釋用PBS 0.1mol/L Na2HPO4-KH2PO4,0.15mol/l NaCl Ph7.2含1%Tween-80。
�。ㄈ�)間接免疫熒光染色方法（FIA試驗)
1．定性檢查 先將待檢血清滅活。在載玻片上以白金耳取抗原液涂片，每片涂4個點，在室溫中晾干，丙酮固定10min。各點分別加－1：50稀釋待檢血清；②－1：200稀釋陽性血清；③－1：50稀釋陰性血清；④－PBS。放入濕盒，在37℃或室溫中放置20min，用PBS振蕩洗滌10min，再加適當(dāng)稀釋的抗人IgG和IgM熒光抗體，再同上條件下放置20min，水洗，封裱，鏡檢。結(jié)果如①、②熒光陽性，③、④陰性，待檢血清即判斷為陽性。陽性時梅毒螺旋體呈明亮的黃綠色熒光，亦有人將待檢血清稀釋1：200作定性檢查，這樣可排除低稀釋時正常人可出現(xiàn)的假陽性反應(yīng)，此法又稱FTA-200試驗。
2．滴度測定 如定性檢查陽性，則被檢血清應(yīng)進(jìn)一步稀釋成1：100，1：200，1：400，1：800，1：1600……以定出染色滴度，滴度疑點以螺旋體發(fā)“++”熒光為標(biāo)準(zhǔn)。
�。ㄋ�)熒光梅毒螺旋體抗體吸收試驗（Fluorescent treponemal antibody – absorption Test 簡稱FTA－ABS)
FTA-200試驗敏感性較差，有時查不出潛伏期和晚期梅毒。FTA－ABC試驗不但敏感性高，而且特異性更好。方法是將非致病性螺旋體Reiter株的培養(yǎng)液于121℃高壓加熱10min，然后高速離心、沉淀，取其上清浸液作為吸附劑，并用以稀釋病人血清（1：5)，然后如上法（FTA試驗)進(jìn)行染色檢查。
FTA-ABC所用的反復(fù)洗滌過的純梅毒螺旋體抗原，推薦置1.0%清蛋白、0.0375mol/l 葡萄糖、0.01mol/L二氯化鎂和0.85%氯化鈉溶液（用0.1mol/L磷酸鉀緩沖液pH6.8配制)中冰凍干燥保存，其中清蛋白起保護劑的作用，葡萄糖可增加折光率，二氯化鎂維持螺旋體的形態(tài)學(xué)，緩沖液穩(wěn)定pH。
�。ㄎ�)梅毒螺旋體的直接檢查法
取梅毒局部硬結(jié)滲出液涂片，用直接法或間接法免疫細(xì)胞化學(xué)染色，更容易發(fā)現(xiàn)隱藏在細(xì)胞碎片之間的螺旋體。免疫熒光檢出效果和暗視野檢一樣敏感。如用RB200標(biāo)記牛清蛋白作初染色，圖像更為清晰。
