2013年度公衛(wèi)執(zhí)業(yè)醫(yī)師考試輔導:多能干細胞
多能干細胞是由Till和McCulloch等在60年代初,應用脾集落形成細胞定量法,首先在小鼠體內(nèi)證明的。他們給經(jīng)射線照射的小鼠輸入同系鼠骨髓細胞,在10~14天后在脾內(nèi)形成可見的結(jié)節(jié),它是由單一骨髓細胞發(fā)育分化而成的細胞集落,稱之為脾集落形成單位(colony forming unit-spleen,CFU-S)。集落數(shù)與輸入的細胞數(shù)成正比,它可分化發(fā)育為紅細胞、粒細胞及巨核細胞。CFU-S長期以來用體內(nèi)集落法進行檢測。
在70年代后Johnson和Metcalf等應用鼠胎肝細胞體外培養(yǎng)法,證明具有CFU-S性質(zhì)的干細胞可在體外培養(yǎng)成功,這是在研究干細胞方法學上的重大改進。
其后,Haral等用小鼠骨髓細胞在甲基纖維素中加入紅細胞生成素(erythropoietin,EPO)及脾細胞培養(yǎng)上清,進行體外培養(yǎng),可形成含有紅細胞、巨核細胞以及巨噬細胞的集落,稱為混合集落形成單位(CFU-Mix)。其后,小林登等在80年代用人骨髓細胞亦報告CFU-Mix培養(yǎng)成功。即由多能干細胞可進一步分化為定向髓系多能干細胞及淋巴系干細胞。淋巴系干細胞是T和B細胞的共同祖先細胞,但目前尚不能用脾集落實驗證明其存在。