醫(yī)學全在線臨床檢驗主管技師：《答疑周刊》2018年第1期
1.【問題】放射免疫和免疫放射是測定抗原還是抗體?
【解答】放射免疫分析（RIA)是放射免疫技術最經(jīng)典的模式。它是以放射性核素標記抗原與反應系統(tǒng)中未標記抗原競爭性結合特異性抗體為基本原理來測定待檢樣品中抗原量的一種分析方法。而免疫放射分析（IRMA)是用放射性核素標記的過量抗體與待檢測抗原直接結合，采用固相免疫吸附載體分離結合與游離標記抗體的非競爭性放射免疫分析。二者的異同點如下：
①標記物 RIA 以放射性核素標記抗原；IRMA 則是標記抗體。
②反應速率 IRMA 反應速度比RIA 快。
③反應原理 RIA 為競爭抑制性結合，反應參數(shù)與待檢抗原量成反相關；IRMA為非競爭結合，反應參數(shù)與待檢抗原成正相關。
④特異性 IRMA 特異性較RIA高。
⑤靈敏度和檢測范圍 IRMA測定的靈敏度明顯高于RIA， IRMA標準曲線工作范圍較RIA寬1～2個數(shù)量級。
⑥其他 RIA 所用抗體為多克隆抗體，對親和力和特異性要求較高，但用量很少；IRMA 為試劑過量的反應，對抗體親和力的要求不及 RIA，但用量大。
此外，RIA 可以測量半抗原，但IRMA只能測定至少有兩個以上表位的抗原。
2.【問題】細菌在酸性，堿性，弱酸性環(huán)境種都帶負電荷嗎？
【解答】在接近中性的環(huán)境中細菌都帶有負電荷，易與帶正電荷的堿性染料結合，故常用堿性苯胺染料如美藍、結晶紫、堿性復紅等染色細菌。
1.堿性染料：電離后顯色離子帶正電荷，易與帶負電荷的被染物結合。由于細菌的等電點在pH2～5之間，在堿性、中性、弱酸性的環(huán)境中細菌均帶負電荷，易與帶正電荷的染料結合而著色。常用的染料有堿性復紅、結晶紫、美藍等。
2.酸性染料：電離后顯色離子帶負電荷，易與帶正電荷的被染物結合。一般情況下細菌都帶有負電荷故不易著色。如果降低菌液的pH使細菌帶正電荷，則可被染色。酸性染料通常用來染細胞漿，而很少用于細菌的染色。常用的酸性染料有伊紅、剛果紅等。
3.復合染料（中性染料)及熒光染料：復合染料是堿性染料和酸性染料的復合物，如瑞氏染料（伊紅美藍)、姬姆薩染料（伊紅天青)等；熒光染料如熒光標記的抗體，熒光素常用異硫氫基熒光素。這些染色常用于某些特殊的染色技術中。
3.【問題】為什么熒光抗體跟特異性的抗原發(fā)生反應后，熒光強度就消失？
【解答】①吸收試驗：向熒光抗體中加入過量相應抗原反應后，再用于陽性標本染色，應不出現(xiàn)明顯熒光；
②抑制試驗：陽性標本先與相應未標記抗體反應，洗滌后，再加熒光抗體染色，熒光強度應受到明顯抑制。
陽性標本是待測抗原，熒光抗體之前已與相應過量抗原反應，再加入陽性標本后已無多余熒光抗體與之反應，因此不出現(xiàn)明顯熒光。
4.【問題】內生肌酐清除率計算方法？
【解答】Ccr = [尿肌酐濃度(μmol/L)×每分鐘尿量(ml/min)]/血漿肌酐濃度(μmol/L)
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