豬病常用的血清學(xué)診斷方法中斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)如何操作?
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第一,硝酸纖維濾膜(NCM)的處理:在濾膜上劃 6毫米X6毫米的方格,在方格中央用蘸水筆尖的圓尾末端壓 成圓形痕跡。置于蒸餾水中浸泡10分鐘,取出后晾干備用。第二,點(diǎn)樣:取1微升待檢液在硝酸纖維濾膜圓圈內(nèi)點(diǎn) 樣,同時(shí)設(shè)立陽(yáng)性與陰性對(duì)照,自然干燥或置37°C溫箱中干 燥。第三,封閉:將硝酸纖維濾膜置于封閉液中,37°C 30分 鐘,用洗滌液洗滌1次,約3分鐘。第四,加豬陽(yáng)性血清,將硝酸纖維濾膜置于豬陽(yáng)性血清 中,37°C作用1小時(shí),取出用洗滌液洗滌3次,每次3分鐘。第五,加酶標(biāo)
兔抗豬免疫球蛋白G,37°C作用1小時(shí),然 后洗滌3?4次,每次3分鐘。
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