水禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病的確診方法有哪些?
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(1)病毒分離①病料采集。采集病變組織或
腫瘤、血漿和泄殖腔拭子，作為病毒分離材料。②病料處理。病變組織或腫瘤病料剪碎、磨細(xì)，用滅菌生理鹽水做1：5稀釋，經(jīng)3 000轉(zhuǎn)／分，離心30分鐘。取上清液加入
青霉素、
鏈霉素使之每毫升各含1 000單位。經(jīng)細(xì)菌檢驗(yàn)陰性者，為病毒分離材料。取血漿上層黃血漿和中間層白細(xì)胞，經(jīng)高速離心取沉淀物，用含有各1 000單位青霉素、鏈霉素滅菌生理鹽水做1：3～1：5稀釋，經(jīng)細(xì)菌榆驗(yàn)陰性者為病毒分離材料。將采集的棉拭子浸泡于含有各2 000單位青霉素、鏈霉素滅菌生理鹽水于室溫作用60分鐘。經(jīng)3 000轉(zhuǎn)／分，離心30分鐘，取上清液經(jīng)細(xì)菌檢驗(yàn)陰性者，為病毒分離材料。③細(xì)胞接種。除病毒分離材料接種于鴨胚腎單層細(xì)胞或鴨胚成纖維細(xì)胞，感染后細(xì)胞一般不會(huì)產(chǎn)生細(xì)胞病變，每代培養(yǎng)7天，當(dāng)細(xì)胞液變黃色時(shí)需換細(xì)胞培養(yǎng)液。需至少
盲傳二代以上。應(yīng)用特異性熒光抗體試驗(yàn)、PCR等方法對(duì)病毒進(jìn)一步鑒定。(2)血清學(xué)診斷方法 一般用病毒中和試驗(yàn)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶免疫測(cè)定、PCR等方法鑒定分離株的抗原和感染禽血清f或卵黃中的抗體。
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血清學(xué)診斷
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實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)確診
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