鵝鴨疫里默氏桿菌病的確診方法有哪些?
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(1)微生物學(xué)檢驗(yàn)病料采集：細(xì)菌學(xué)檢查可取腦、肝、脾組織觸片或心血、
心包液涂片，進(jìn)行革蘭氏或瑞氏染色，觀察細(xì)菌形態(tài)。同時取病料進(jìn)行病原的分離培養(yǎng)，觀察其培養(yǎng)特性。急性期且未使用過抗生素的病例，或死亡病例較適宜于進(jìn)行細(xì)菌鏡檢和分離培養(yǎng)。腦和心血中最易分離出病原菌，約80%甚至90%左右的病例腦組織中可分離到病原菌。約60%的病例心血中可分離到病原菌，約10%左右的病例肝、脾組織可分離到病原菌。另外，還可從氣囊、骨髓、肺、呼吸道以及病變的滲出物中分離到病原菌，疾病急性期的鼻腔分泌物中亦可分離到病原菌。分離培養(yǎng)：應(yīng)用血液瓊脂或巧克力瓊脂，在5%-10%的C02條件下37℃培養(yǎng)48小時，生長出直徑約1～2毫米、圓形、光滑、突起的奶油狀的菌落。選擇純培養(yǎng)物進(jìn)行生化試驗(yàn)，鑒定其主要生化特性是否與鴨疫里默氏桿菌相符合。(2)血清學(xué)檢驗(yàn)應(yīng)州標(biāo)準(zhǔn)的分型抗血清，可進(jìn)行玻板或試管凝集試驗(yàn)，以及瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)鑒定血清型。由于鴨疫里默氏桿菌的血清型較多，且不同血清型之間缺乏抗原交叉反應(yīng)，這給本病血清學(xué)檢測的推廣和應(yīng)用帶來困難。以防漏檢，檢測抗原時應(yīng)用擁有各型標(biāo)準(zhǔn)抗血清，檢測抗體時，又應(yīng)擁有各型標(biāo)準(zhǔn)菌株作為抗原。目前主要的血清學(xué)檢測方法有：①凝集試驗(yàn)。a．快速玻板凝集試驗(yàn)。將各型標(biāo)準(zhǔn)抗血清分別滴加于玻片上，取待檢菌株丁血清中混勻后在3～5分鐘內(nèi)觀察凝集結(jié)果，即可判定血清型。b．試管凝集試驗(yàn)。將標(biāo)準(zhǔn)抗血清倍比稀釋，待檢菌株經(jīng)純培養(yǎng)后，用0.3%的福爾馬林液PBS洗滌并制成懸液，調(diào)節(jié)OD525至0.2，抗血清與抗原各0.5毫升混合，37℃作用18小時后觀察結(jié)果。②瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)。待檢菌株純培養(yǎng)后，經(jīng)沸水煮1小時或高壓121℃1小時制成抗原。操作按常規(guī)方法進(jìn)行。③間接血凝試驗(yàn)。各型標(biāo)準(zhǔn)菌體作為檢驗(yàn)抗原，致敏醛化的
綿羊紅細(xì)胞。將待檢血清倍比稀釋，與致敏紅細(xì)胞37℃作用1～1.5小時后判斷結(jié)果，以50%的致敏紅細(xì)胞凝集，判為陽性。(3)動物接種將細(xì)菌分離培養(yǎng)物經(jīng)肌肉、靜脈或腹腔等途徑接種。用于接種的易感雛鵝應(yīng)來源于未發(fā)生過鴨疫里默氏桿菌病的飼養(yǎng)場，并且適齡、健康未使用過各類鴨疫里默氏桿菌疫苗。接種后觀察是否出現(xiàn)本病特征性的臨診癥狀及病理變化，同時接種豚鼠、家
兔和小白鼠，本菌能致死豚鼠，但不致死家兔和小白鼠。
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微生物學(xué)檢驗(yàn)
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實(shí)驗(yàn)室檢測
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