雞的瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)的操作是怎樣的
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① 瓊脂平板的制備：稱取瓊脂粉1.2克，置于150毫升三角 瓶中，然后加入100毫升磷酸鹽緩沖液在水浴中煮沸融化瓊脂, 加人0.01%的硫柳汞，待瓊脂冷卻至55 "C左右時(shí)倒人直徑90 毫米的平皿內(nèi)，每個(gè)平皿加人20毫升，待瓊脂凝固后，放入普 通冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆谩?② 打孔：將平板從冰箱中取出，在酒精燈上稍加熱以蒸發(fā)其 表面水分，用外徑為4毫米的打孔器按六角形圖案打孔，中心孔與周圍孔的孔距為3毫米（如圖7-1)，將孔中的瓊脂用8號(hào)針頭輕輕向上挑出即可③加樣：中心孔加IBDV抗原，1、4孔加陽性血清，2、3、5、6孔各加待檢血清，加至孔滿為止。待孔中液體吸干后，將平皿倒置，放人37 X：箱中，保持一定的濕度，經(jīng)24小時(shí)后觀察結(jié)果。④判定結(jié)果：標(biāo)準(zhǔn)陽性血清與抗原之間有明顯的沉淀線時(shí)， 被檢血清與抗原之間也形成沉淀線的判定為陽性，否則判定為陰 性。
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