病毒雞胚培養(yǎng)絨毛尿囊膜接種法如何接種?
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選用孵化10?12天的雞胚,通過照視,畫 出氣室及絨毛尿囊膜的發(fā)育面,在絨毛尿襄膜處(靠近胚胎無 大血管處)的蛋殼上用碘酒和酒精消毒后,銼成一個(gè)三角形或 方形裂痕,除去蛋殼造成“卵窗”,注意勿傷及殼膜。另在氣室 頂部的蛋殼上鉆一小孔,將蛋橫臥于蛋盤(座)上,在“卵窗”處 滴無菌鹽水1滴于殼膜上,以針尖將殼膜劃破一小孔,不可傷 及下面的絨毛尿囊膜,然后用膠皮乳頭置氣室端的小孔處往外吸氣,使鹽水滲人殼膜與絨毛尿囊膜的裂隙內(nèi),此時(shí)絨毛尿囊膜即下陷與殼膜完全 分離,而形成人工氣室。用注射器注 人0.05毫升病毒液于 絨毛尿囊膜表面(應(yīng)于 1?2小時(shí)內(nèi)接種,否則 干燥后不能使用),然后 用玻璃紙蓋于卵窗上, 周圍涂以熔化的石蠟密 封。同時(shí)封閉氣室端小孔,將蛋橫臥于蛋盤上,放在35?37°C溫箱內(nèi),不要翻動(dòng),每 日向卵窗內(nèi)檢査1次。如病毒發(fā)育良好,則雞胚通常在48? 96小時(shí)內(nèi)死亡。
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