如何進行鴨瘟的實驗室診斷?
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(1) 病料的采集與處理無菌采集剛死或瀕臨死亡鴨的 肝、脾臟，按病毒病料的常規(guī)處理方法,制作分離病毒無菌病 料樣品。(2) 病毒分離與動物回歸試驗取處理好的無菌病料接種9?14日齡鴨胚的絨毛尿囊膜，0. 2毫升/胚，于38°C孵育， 收集合格的尿囊液，以同樣的方法接種鴨胚并傳至4代，分別 收集48?96小時死亡胚胎的尿囊液，過濾細菌，保存。剖檢死亡胚體，可見皮膚出血，其中以頭部、胸部最為嚴 重。有的肝臟有出血點或壞死。動物回歸試驗:將30只未免疫的20日齡健康鴨分成3 組，10只/組。實驗組腿部肌內注射第三代死亡鴨胚尿囊液， 0.2毫升/只。疫苗組先用鴨瘟疫苗免疫，7日后，腿部肌內注 射第四代死亡鴨胚尿囊液，〇. 2毫升/只。對照組注射等量生 理鹽水。如果實驗組在注射鴨胚尿囊液96小時后出現(xiàn)流淚， 采食量下降，體溫升高，精神沉郁等癥狀，并陸續(xù)死亡,解剖可 見鴨瘟的剖檢病變。而對照組和疫苗組全部健康，無死亡，則 分離到的病毒為鴨瘟病毒。(3) 鴨瘟的血清學診斷① 酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)應用酶聯(lián)免疫吸附試驗 (ELISA)，從血、肝、脾等鴨瘟病料中直接檢出病毒，達到提前 檢出鴨瘟病毒的目的。通過間接ELISA試驗檢測鴨群血清， 可以快速、敏感、特異地檢出血清中抗鴨瘟病毒抗體，本試驗 檢測鴨瘟抗體的敏感性比血清中和試驗高得多。② 微量固相放射免疫試驗（Micro^SPRIA) 以表面能吸 附抗體的塑料或其他材料作為固相載體，用同位素標記抗體 或抗原，以測定相應抗原或抗體的一種微量檢測技術。其優(yōu) 點是特異性強、敏感性高、快速和經(jīng)濟，但所需實驗條件要求 較高。③ 中和試驗用已知鴨瘟病毒的免疫血清與分離株進行 中和試驗，或用已知病毒測定未知血清及效價，中和試驗可作 為抗體檢測和病毒鑒定的可靠方法。據(jù)報道，血清抗體中和 指數(shù)達1.75以上的，表示此鴨曾受鴨瘟強毒感染。中和試驗 技術要求高，操作復雜，周期長，不適用于基層和大量樣品檢 測。(4) B瘇的分子生物學診斷聚合酶鏈式反應（PCR)檢 測鴨瘟病毒：主要用于鴨瘟病毒細胞培養(yǎng)毒和禽胚尿囊液培養(yǎng)毒及組織樣品的鴨瘟病毒診斷。程安春等建立的PCR檢 測鴨瘟病毒，在鴨感染鴨瘟后4小時，就可從糞便等檢測到鴨 瘟病毒，特別適合于鴨瘟的早期診斷。(5)電鏡檢査對分離的鴨瘟病毒進行電鏡觀察可見皰 疹病毒的典型形態(tài)結構，病毒粒子直徑范圍為32?181納米， 有一個致密的核心區(qū)和一層著色較淡的套膜。
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