四、尿中葡萄糖的檢驗(yàn)
健康家畜的尿中僅含微量的葡萄糖,用一般化學(xué)試劑無法檢出,故認(rèn)為正常尿中不含糖。用一般方法能檢驗(yàn)出尿中含葡萄糖時(shí),稱為糖尿(Glycosuria),表示機(jī)體的碳水化合物代謝障礙或腎的濾過機(jī)能嚴(yán)重破壞。
1.原理葡萄糖含有自由醛基(一CHO),具有還原性質(zhì),在熱堿性溶液中,能將硫酸銅還原成黃色的氧化銅或黃色的氧化亞銅,又因二價(jià)銅鹽在水解時(shí)會(huì)生成不溶解的氫氧化銅沉淀,故在試劑中加入檸檬酸鈉,使與銅離子結(jié)合,以保持穩(wěn)定狀態(tài)。
2.試劑班氏(Benedict)試劑:
結(jié)晶硫酸銅17.3g無水碳酸鈉100.0g
檸檬酸鈉173.0g蒸餾水加至1000.0ml
先將檸檬酸鈉及無水碳酸鈉溶解于700m1蒸餾水中,可加熱促其溶解。另將硫酸銅溶解于100m1蒸餾水中,然后將硫酸銅液慢慢傾入已冷卻的上液內(nèi),并加蒸餾水至1000.0ml,過濾保存于褐色瓶內(nèi)備用。
3.方法取班氏試劑5m1置于試管中,加尿液0.5m1(約10滴)充分混合,加熱煮沸1-2min,靜置5min后觀察結(jié)果判斷,管底出現(xiàn)黃色或黃紅色沉淀者為陽性反應(yīng)。黃色或紅色的沉淀愈多,表示尿中葡萄糖含量愈高。亦可按下表估計(jì)葡萄糖的大約含量。
4.注意事項(xiàng)
(1)尿中如含有蛋白質(zhì),應(yīng)把尿加熱煮沸,然后過濾,再行檢驗(yàn)。
(2)尿液與試劑一定要按規(guī)定的比例加入,如尿液加得過多,由于尿液中某些其他微量的還原物質(zhì),也可呈現(xiàn)還原作用而產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。
(3)應(yīng)用水楊酸類,水合氯醛,維生素C及辭霉素治療時(shí),原內(nèi)可能有還原物質(zhì)而致假陽性反應(yīng)。
五、尿中酮體的檢驗(yàn)
酮體包括三種物質(zhì),即p-羥丁酸(CH3CHOHCH2COOH),乙酰乙酸(CH3COCH3COOH)和丙酮(CH3COCHa),這些物質(zhì)都是脂肪酸氧化程序不能完成的結(jié)果。
健康家畜的尿中含微量的酮體,用一般化學(xué)試劑無法檢出,當(dāng)尿中含多量酮體時(shí),稱為酮尿(Ketonuria)。
1.原理尿液中的乙酰乙酸,丙酮,在堿性溶液中,與亞硝基鐵氰化鈉作用產(chǎn)生紅紫色的亞鐵五氰化鐵,這種物質(zhì)在醋酸溶液內(nèi)不但不褪色,而且色澤深度還會(huì)增加。
2.試劑
(1)5%亞硝基鐵氰化鈉水溶液,此液不能長期保存,應(yīng)配制新鮮溶液并貯于棕色瓶中。
(2)10%氫氧化鈉水溶液。
(3)20%醋酸(98%的醋酸20ml,加蒸餾水至l00ml)。
3.方法取中試管一支,先加尿液5ml,隨即加入5%亞硝基鐵氰化鈉溶液和10%氧氧化鈉各0.5ml(約10滴),顛倒混合,再加20%醋酸lml(約20滴),顛倒混合,觀察結(jié)果判斷:尿液呈現(xiàn)紅色者為陽性反應(yīng),加入20%醋酸后紅色又消失者為陰睦反應(yīng)。根據(jù)顏色的不同,可估計(jì)丙酮的大約含量。
4.注意事項(xiàng)尿液采集后立即送檢或冷藏,否則,在室溫中放置過久,其中的丙酮會(huì)自行揮發(fā),影響檢驗(yàn)結(jié)果。
六、尿沉渣檢查
尿沉渣(Urine叫ediment)包括無機(jī)沉渣和有機(jī)沉渣,用顯微鏡觀察沉渣的種類,能查明理化檢查所不能發(fā)現(xiàn)的病理變化,對泌尿系統(tǒng)疾病的定位診斷具有重要意義。
取尿液約10以置離心管中,以:1000r/min離心5min,用滴管將上清液吸出,輕輕振播離心管,使沉渣均勻地混懸于少量剩余尿中。用吸管吸取沉渣一清置載玻片上,加蓋玻片;為使沉渣便于識(shí)別,可在載玻片上滴加0.4%碘溶液,髓使上皮細(xì)胞呈淺黃色,掃細(xì)胞或膿細(xì)胞呈棕黃色;鏡檢時(shí),宜將聚光器降低,光圈縮小,使視野稍暗,先用低倍鏡檢視,然后換,高倍鏡觀察。報(bào)告撿查結(jié)果,可用“少量”、“中等量”及’多量“字樣表示。
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