北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部1999年生物化學(xué)(專業(yè))(碩士) Ⅰ.問答題: (一) 某生物化學(xué)家發(fā)現(xiàn)并純化了一種新的酶,純化過程及結(jié)果如下表: 操作程序 總蛋白 (mg) 活性(u) 1.粗提取 20.000 4.000.000 2鹽析沉淀 5.000 3.000.000 3PH沉淀 4.000 1.000.000 4離子交換層析 200 800.000 5親和層析 50 75.000 6排阻層析 45 67500 根據(jù)表中結(jié)果: (1)計(jì)算每一步純化程序后酶的比活性 (2)指出哪一步對(duì)酶的純化最有效 (3)指出哪一步對(duì)酶的純化最無效 (4)表中結(jié)果能否說明酶已經(jīng)被純化?若估計(jì)乜的純化程度還需要做些什么? (5)若該單純酶由682個(gè)氨基酸殘基組成,該酶的分子量約為多少? (二) 若肝中有大量6-磷酸葡萄糖,試述其主要去路。 (三) 含奇數(shù)原子的脂肪酸在體內(nèi)能否被徹底氧化成CO2和H2O,為什么?這類脂肪酸能否在體內(nèi)轉(zhuǎn)變?yōu)樘,為什么?BR>(四) 請(qǐng)回答出甘氨酸在體內(nèi)可能的5種代謝途徑,并簡(jiǎn)述起意義。 (五) 實(shí)驗(yàn)證明在一定時(shí)間內(nèi)細(xì)菌合成RNA的40~50%為mRAN,但細(xì)菌體內(nèi)mRAN卻僅占總RNA的3%,為什么? (六) 解釋限制性核酸內(nèi)切酶及"Kbp"。有一端DNA(線性)長(zhǎng)10.0Kbp,經(jīng)限制性核酸內(nèi)切酶A消化可得3.0和7.0Kbp兩種DNA片段;若經(jīng)限制性核酸內(nèi)切酶B消化可得0.5,1.0和8.5Kbp三種水解片段;若經(jīng)限制性核酸內(nèi)切酶A,B兩種酶共同消化可得0.5,1.0,2.0和6.5Kbp四種水解片段,請(qǐng)?jiān)诤?jiǎn)圖中注明A,B酶的識(shí)別位點(diǎn)。 (七) 原核生物蛋白質(zhì)合成其始復(fù)合物有哪些成分組成?圖示該復(fù)合物的形成過程。 (八) 何謂不穩(wěn)定堿基對(duì)?不穩(wěn)定堿基對(duì)給予反密碼子與密碼子的哪個(gè)堿基配對(duì)? (九) 寫出E.coliDNA聚合酶的亞基組成;敘述其中任二亞基功能。說明σ因子的功能意義。 Ⅱ填空題: 1.合成糖原時(shí),葡萄糖活性供體是----------。合成卵磷脂時(shí)所需的活性堿基是----------。 2.神經(jīng)鞘磷脂的分子結(jié)構(gòu)不含甘油,含有脂肪;,--------和------。 3.參與組成輔酶的A 的維生素是------。參與組成NAD+和NADP+的維生素是-------- 4.必須氨基酸包括Val,Leu,Ile,Thr,Lys,Met,----,------ 5.參與生物轉(zhuǎn)化的混合功能氧化酶體系中包括兩種酶------和------ 6.蛋紅素在血中的是由------幫助運(yùn)輸?shù)?BR>7.初級(jí)游離型膽汁酸主要是指---- 8.參與鈣磷代謝的調(diào)節(jié)的激素,除甲狀旁腺外,還有------及---- 9.在體內(nèi),鈣2+常與------蛋白結(jié)合,這種蛋白質(zhì)有重要的生理作用,并廣泛分布于全身組織。 10.體內(nèi)的H2O2的重要來源之一是2O2+2H2+→H2O2+O2-,此反應(yīng)是在------酶的催化下進(jìn)行的。 11.HnRNA分子形成成熟mRAN的剪接過程包括去除------拼接--- 12.在DNA合成過程中改變DAN分子超螺旋構(gòu)型的酶是-------- 13.在原核細(xì)胞中操縱子調(diào)控模式中,阻遏蛋白能----基因結(jié)合,RAN聚合酶與----結(jié)合。 14.一種氨基酸可能有--個(gè)密碼子,一個(gè)密碼子可能代表--種氨基酸 15.蛋白質(zhì)合成的調(diào)控,主要是在----水平進(jìn)行 16.脫氧核苷酸所含的脫氧核糖是通過相應(yīng)的核糖核苷酸直接還原而成的。這種還原作用是在----水平上進(jìn)行的 17.體內(nèi)從頭合成嘧啶堿的原料是----和------ 18.體內(nèi)尿素合成時(shí),其中兩個(gè)氨的直接來源是--------和------ 19.牛璜酸是------氨酸的脫羧產(chǎn)物 20.氨基甲酰磷酸合成酶------與--------合成有關(guān) Ⅲ 選擇題(說明:每題一分,共20分,選擇最佳答案) 1.糖酵解中生成的丙酮酸必須進(jìn)入線粒體氧化是因?yàn)椋ǎ? A 乳酸不能通過線粒體膜 B 這樣胞液可保持電中性 C 丙酮酸脫氫酶體系在線粒體內(nèi) D 丙酮酸與蘋果酸交換 E 以上都不對(duì) 2 下列哪一種氨基酸不含極性側(cè)鏈() A -氨酸 B 亮氨酸 C 絲氨酸 D 半胱氨酸 E 酪氨酸 3 下列對(duì)活化能的描述哪項(xiàng)是恰當(dāng)?shù)模ǎ?BR>A 隨溫度而改變 B 是底物和產(chǎn)物能量水平的差值 C 酶降低反應(yīng)活化能的程度與一般催化劑相同 D 是底物分子從初態(tài)轉(zhuǎn)變到過渡態(tài)所需要的能量 E 以上都不是 4 血漿免疫球膽白(Ig)屬于() A 脂蛋白 B 糖蛋白 C 磷蛋白 D 核蛋白 E 單純蛋白質(zhì) 5 5-Fu的抗癌作用機(jī)理為() A 合成錯(cuò)誤的DNA ,抑制癌細(xì)胞的生長(zhǎng) B 抑制尿嘧啶的合成,從而減少RNA的生物合成 C 抑制胞嘧啶的合成,從而減少DNA的生物合成 D 抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶的活性,從而抑制DNA的生物合成 E 抑制二氫葉酸還原酶的活性,從而抑制TMP的合成 6與DNA修復(fù)過程缺陷有關(guān)的疾病是 A 著色性干皮病 B 黃嘌呤尿癥 C 卟啉病 D 黃疸 E 痛風(fēng)
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