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生物工程發(fā)酵法表達(dá)、生產(chǎn)莽草酸的方法及其構(gòu)建的工程菌

公開(公告)號(hào) CN101134958A  
公開(公告)日 2008.03.05  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200610112665.7  
申請(qǐng)日期 2006.08.29  
專利名稱 生物工程發(fā)酵法表達(dá)、生產(chǎn)莽草酸的方法及其構(gòu)建的工程菌  
主分類號(hào) C12N15/09(2006.01)I  
分類號(hào) C12N15/09(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I;C12N15/52(2006.01)I;C12P7/42(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 上海海泰藥業(yè)有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 汪 莉;王瑾峰  
地址 201203上海市張江高科技園區(qū)哈雷路899號(hào)A310室  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu)  
代理人  
國(guó)省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種利用生物合成技術(shù)制備莽草酸的方法,主要包括以下步驟: (1)利用基因工程技術(shù)構(gòu)建莽草酸代謝途徑限速酶的PtacaroFaroBaroEkan多基因盒; (2)利用Red重組系統(tǒng)敲除細(xì)菌中的莽草酸激酶同工酶aroK和aroL; (3)敲除細(xì)菌中的shiA基因,并敲入PtacaroFaroBaroEkan多基因盒; (4)利用基因工程技術(shù)發(fā)酵該重組工程菌獲得莽草酸; (5)分離、純化莽草酸。  
摘要 本發(fā)明公開了一種利用生物合成技術(shù)制備莽草酸的方法,還公開了該方法中所用的重組大腸桿菌。本發(fā)明的方法包括構(gòu)建包含莽草酸代謝途徑限速酶多基因盒的載體;將多基因盒替代shiA基因;利用Red重組系統(tǒng)敲除細(xì)菌中的莽草酸激酶同工酶;發(fā)酵重組工程菌獲得莽草酸及莽草酸純化等步驟。通過本發(fā)明的方法,可以提高莽草酸的表達(dá)產(chǎn)量,降低生產(chǎn)莽草酸成本,為生產(chǎn)防治流感藥物達(dá)菲提供原料,具有重要的經(jīng)濟(jì)、社會(huì)價(jià)值。  
國(guó)際公布  
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