| 公開(公告)號(hào) | CN100363497C |
| 公開(公告)日 | 2008.01.23 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200510065889.2 |
| 申請(qǐng)日期 | 2005.04.21 |
| 專利名稱 | 基因重組技術(shù)制備PGRP31-98片段的方法 |
| 主分類號(hào) | C12N15/63(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N15/63(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/13(2006.01)I;C07K16/30(2006.01)I;C07K1/14(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國輻射防護(hù)研究院 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 周小林 |
| 地址 | 030006山西省太原市學(xué)府街270號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 核工業(yè)專利中心 |
| 代理人 | 任曉航 |
| 國省代碼 | 山西;14 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種基因重組技術(shù)制備PGRP(31-98)片段的方法，其特征在于：該方法用pRSETc載體與PGRP(31-98)基因片段進(jìn)行連接，采用NheI和HindIII雙酶切位點(diǎn)定向克隆，以保證正確的插入連接方向；將連接有目的基因的pRSETc載體轉(zhuǎn)化到廣泛用于靶基因表達(dá)的大腸桿菌BL21DE3進(jìn)行重組表達(dá)；將表達(dá)的PGRP(31-98)產(chǎn)物進(jìn)行分離、純化。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種肺癌抗原的人工制備技術(shù)，具體為基因重組技術(shù)制備PGRP(31-98)片段的方法。該方法用pRSETc載體與PGRP(31-98)基因片段進(jìn)行連接，采用NheI和HindIII雙酶切位點(diǎn)定向克隆，以保證正確的插入連接方向；將連接有目的基因的pRSETc載體轉(zhuǎn)化到廣泛用于靶基因表達(dá)的大腸桿菌BL21DE3進(jìn)行重組表達(dá)；將表達(dá)的PGRP(31-98)產(chǎn)物進(jìn)行分離、純化。保證了PGRP(31-98)表達(dá)產(chǎn)物的正確、特異、穩(wěn)定和高效，相對(duì)現(xiàn)有技術(shù)大大縮短了制備的時(shí)間；克服了現(xiàn)有技術(shù)中用溴化氰切除表達(dá)產(chǎn)物上的TrpE蛋白帶來的缺點(diǎn)，有利于大量人工制備工藝的建立和產(chǎn)品的穩(wěn)定。 |
| 國際公布 |
