| 公開(公告)號 | CN1114692C |
| 公開(公告)日 | 2003.07.16 |
| 申請(專利)號 | CN97194333.8 |
| 申請日期 | 1997.03.06 |
| 專利名稱 | 擬南芥中的質(zhì)體轉(zhuǎn)化 |
| 主分類號 | C12N15/00 |
| 分類號 | C12N15/00;C12N15/63 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1996.3.6 US 60/012,916 |
| 申請(專利權(quán))人 | 拉杰斯大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | P·馬利加;S·R·思克達(dá);S·V·雷戴 |
| 地址 | 美國新澤西州 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | PCT/US97/03444 1997.3.6 |
| 進(jìn)入國家日期 | 1998.11.02 |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 中國專利代理(香港)有限公司 |
| 代理人 | 齊曾度 |
| 國省代碼 | 美國;US |
| 主權(quán)項(xiàng) | 獲得轉(zhuǎn)質(zhì)體基因組的擬南芥或蕓苔植株的方法，其包括：a)在高植物生長激素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)來自擬南芥或蕓苔植株的擬南芥或蕓苔植株細(xì)胞，以刺激均一細(xì)胞分裂；b)將所述植物細(xì)胞轉(zhuǎn)至瓊脂固化培養(yǎng)基上的濾紙上；c)將轉(zhuǎn)化DNA分子傳遞到所述植物細(xì)胞的質(zhì)體基因組中，所述轉(zhuǎn)化DNA分子含有：i)包含來自待轉(zhuǎn)化質(zhì)體基因組的質(zhì)體DNA序列的多個尋靶區(qū)段，所述尋靶區(qū)段有助于所述轉(zhuǎn)化DNA同源重組進(jìn)入所述質(zhì)體基因組；ii)來自質(zhì)體DNA的5’端和3’端調(diào)控序列，它操作性地連接到所述尋靶區(qū)段中的選擇性標(biāo)記基因上，所述調(diào)控序列有助于選擇性標(biāo)記基因的表達(dá)和所編碼mRNA的穩(wěn)定，所述選擇性標(biāo)記基因在植物細(xì)胞中賦予對選擇性試劑的抗性；iii)來自質(zhì)體DNA的5’端和3’端調(diào)控序列，它操作性地與包含外源目的基因的編碼序列連接，從而有助于外源目的基因的表達(dá)及所編碼mRNA的穩(wěn)定；和iv)用于將所述外源基因鄰近所述選擇性標(biāo)記基因插入的至少一個克隆位點(diǎn)，所述插入不干擾所述選擇性表型的賦予及質(zhì)體側(cè)翼基因的功能；d)將在步驟(c)中轉(zhuǎn)化的細(xì)胞以高密度轉(zhuǎn)至瓊脂固化的高細(xì)胞激動素培養(yǎng)基上培養(yǎng)預(yù)定的時間，所述培養(yǎng)基含有可促進(jìn)植株再生的試劑；e)將按步驟(d)處理的細(xì)胞轉(zhuǎn)至含所述再生促進(jìn)試劑和選擇性試劑的瓊脂固化培養(yǎng)基中，所述轉(zhuǎn)化細(xì)胞通過所述選擇性標(biāo)記基因的表達(dá)被賦予對所述選擇性試劑的抗性；并且f)選擇具有轉(zhuǎn)化的質(zhì)體基因組的細(xì)胞并從中誘導(dǎo)植株再生。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供獲得轉(zhuǎn)質(zhì)體基因組擬南芥屬植物和蕓苔屬植物的方法與組合物。具體地說，本方法提供有助于導(dǎo)入外源有益DNA分子后轉(zhuǎn)化植株再生的培養(yǎng)方案和組合物。 |
| 國際公布 | WO97/32977 英 1997.9.12 |
