| 公開(公告)號 | CN1116413C |
| 公開(公告)日 | 2003.07.30 |
| 申請(專利)號 | CN99121831.0 |
| 申請日期 | 1999.10.19 |
| 專利名稱 | 人視黃醇結(jié)合蛋白基因的高效表達及其專用引物 |
| 主分類號 | C12N15/12 |
| 分類號 | C12N15/12;C12N15/63;C12N15/70 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 徐琪壽;梁學(xué)穎;黃英武;劉云;劉志紅;劉耀清 |
| 地址 | 100850北京市海淀區(qū)太平路27號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 關(guān)暢 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項 | 一種人視黃醇結(jié)合蛋白基因的高效表達方法，其特征在于由以下步驟組成：(1)從人肝組織中提取總RNA；(2)合成上游引物P1：5’TTTGAATTCATATGGAGCGCTACTGCCGAGTGAG3’下游引物P2：5’TTTGGATCCCTACAAAAGGTTTCTTTC3’；(3)通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)得到人視黃醇結(jié)合蛋白基因片段；(4)將基因克隆入pET3a、pET22b(+)或pBV220原核表達載體中；(5)pET3a-RBP、pET22b(+)-RBP或pBV220-RBP原核表達。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種人視黃醇結(jié)合蛋白的基因高效表達方式及其專用引物，其方法為：(1)從人肝組織中提取總RNA；(2)合成上游引物P1：5’TTTGAATTCATATGGAGCGCTACTGCCGAGTGAG3’；下游引物P2：5’TTTGGATCCCTACAAAAGGTTTCTTTC3’；(3)通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應(yīng)得到人視黃醇結(jié)合蛋白基因片段；(4)將基因克隆入pET3a、pET22b(+)或pBV220原核表達載體中；(5)pET3a-RBP、pET22b(+)-RBP或pBV220-RBP原核表達。本發(fā)明公開的專用引物，上游引物為P1：5’TTT GAA TTC ATA TGG AGC GCT ACT GCC GAG TGA G3’；下游引物為P2：5’TTT GGATCC CTA CAA AAG GTT TCT TTC 3’。本方法具有表達量高，成本低等優(yōu)點。 |
| 國際公布 |
