| 公開(公告)號(hào) | CN1431308A |
| 公開(公告)日 | 2003.07.23 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN03114994.4 |
| 申請(qǐng)日期 | 2003.01.20 |
| 專利名稱 | 一種重組人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子的制備方法和應(yīng)用 |
| 主分類號(hào) | C12N15/12 |
| 分類號(hào) | C12N15/12;C12N15/81;A61K38/18;A61P7/06 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 復(fù)旦大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 宋后燕;王躍祥 |
| 地址 | 200433上海市邯鄲路220號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海正旦專利代理有限公司 |
| 代理人 | 包兆宜 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種制備重組人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子121的方法，其特征在于采用下列步驟：(1)分離總RNA，用RT-PCR的方法克隆VEGF121cDNA基因；(2)VEGF121 cDNA基因與表達(dá)載體重組；(3)用上述重組表達(dá)載體電穿孔法轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，使VEGF121cDNA 基因以多拷貝形式與宿主細(xì)胞染色體發(fā)生重組；(4)培養(yǎng)宿主細(xì)胞，從培液中回收和純化終產(chǎn)物；(5)生物學(xué)方法鑒定重組人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子121。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種重組人血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子121(r-hVEGF121)及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明應(yīng)用RT-PCR方法，擴(kuò)增人VEGF121cDNA基因片段，與酵母表達(dá)載體pPIC9K重組，獲得表達(dá)質(zhì)粒p9KVEGF121，轉(zhuǎn)化畢赤酵母菌GS115，篩選出高效表達(dá)工程菌株。工程菌經(jīng)發(fā)酵、誘導(dǎo)表達(dá)，分離純化后，純度95％以上。實(shí)驗(yàn)證明本發(fā)明產(chǎn)物具有高效的促血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖功能和促血管通透作用和防治缺血性疾病的應(yīng)用價(jià)值。 |
| 國際公布 |
