| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1453355A |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2003.11.05 |
| 申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) | CN02109527.2 |
| 申請(qǐng)日期 | 2002.04.23 |
| 專(zhuān)利名稱(chēng) | 從地龍體內(nèi)提取超氧化物歧化酶的方法 |
| 主分類(lèi)號(hào) | C12N9/08 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12N9/08;C07K1/14 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 | 劉玉才 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 劉玉才;劉晟至 |
| 地址 | 110014遼寧省沈陽(yáng)市沈河區(qū)沈洲路28-4-E座432號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) | 沈陽(yáng)智龍專(zhuān)利事務(wù)所 |
| 代理人 | 宋鐵軍 |
| 國(guó)省代碼 | 遼寧;21 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種從地龍?bào)w內(nèi)提取超氧化物歧化酶的方法，其特征在于：該方法的制備步驟如下：a、將活蚯蚓洗凈，置于新鮮水中或含不超過(guò)0.3％(以重量計(jì))的有機(jī)酸鈉鹽中清洗，直至其消化道內(nèi)的污物被徹底清除，然后在除去其表面軀體上的所有污物；b、將活蚯蚓濕磨，得到的蚓汁在-60℃～-10℃的溫度下冷凍后儲(chǔ)存；c、新鮮的蚓汁或其冷凍物在PH值7.6、25mmol/LTris-Gly緩沖液中勻漿2L/kg，攪拌1～2小時(shí)，15000r/min離心30分鐘，棄沉淀物得清夜；d、上述清夜于65℃加熱10～20分鐘，冷卻至4℃，過(guò)濾后濾液中加入1.25倍體積的丙酮，收集沉淀，沉淀物用少量的PH值7.6、25mmol/LTris-Gly緩沖液溶解，棄沉淀物得上清液；e、上清液在攪拌下加入內(nèi)含10molmg、10molCu、10molZn，飽和度達(dá)45％，繼續(xù)攪拌15分鐘，然后在2000r/min離心30分鐘，棄去沉淀，向上清液中繼續(xù)加入硫酸銨溶液，使其飽和度達(dá)65％，離心收集沉淀；f、將上述沉淀溶解在PH值7.6、25mmol/LTris-Gly緩沖液中，接著透析至無(wú)SO2-4透析液最后上DEAE-Sephadex A-50層析柱(柱床體積為2.5×50cm)，收集洗脫液，濃縮、冷卻、干燥，即得藍(lán)綠色的Cu、ZnSOD。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種從生物體內(nèi)提取超氧化物歧化酶的工藝制備方法。該方法的制備步驟為：將活蚯蚓洗凈，濕磨，得到的蚓汁經(jīng)過(guò)冷凍、在緩沖液中勻漿、攪拌，離心，棄沉淀物得清液；上述清液進(jìn)行加熱，冷卻，過(guò)濾后濾液中加入丙酮，沉淀物用緩沖液溶解，棄沉淀物得上清液；上清液在攪拌下加入mg、Cu、Zn，然后離心，棄去沉淀，向上清液中加入硫酸銨溶液，離心收集沉淀；將上述沉淀溶解在緩沖液中，接著透析至無(wú)SO2-4，透析液最后上層析柱收集洗脫液，濃縮、冷卻、干燥，即得藍(lán)綠色的Cu、ZnSOD。本發(fā)明的目的是提供一種從地龍的體內(nèi)提取超氧化物歧化酶的方法，以解決消耗資源大、提取SOD成分低等方面存在的問(wèn)題。 |
| 國(guó)際公布 |
