| 公開(公告)號(hào) | CN1480537A |
| 公開(公告)日 | 2004.03.10 |
| 申請(專利)號(hào) | CN02131070.X |
| 申請日期 | 2002.09.28 |
| 專利名稱 | 通過檢測人類T細(xì)胞受體TCR基因在治療前后的變化來評價(jià)治療HIV藥物療效的方法 |
| 主分類號(hào) | C12Q1/68 |
| 分類號(hào) | C12Q1/68 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 北京佰仁思生物工程有限責(zé)任公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 寇忠琛 |
| 地址 | 102200北京市海淀區(qū)中關(guān)村科技園區(qū)昌平園星火街6號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京匯澤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 張若華 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 通過檢測人類T細(xì)胞受體TCR基因在治療前后的變化來評價(jià)治療HIV藥物療效的方法，其步驟為：a.血樣經(jīng)采集分離后，得到外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)，再進(jìn)一步分離出CD4或CD8T細(xì)胞；b.分離和提純出T細(xì)胞的mRNA后，通過mRNA合成得到cDNA；c.在極其靠近CDR3區(qū)段V基因區(qū)設(shè)計(jì)24個(gè)內(nèi)側(cè)Vβ基因引物和一個(gè)側(cè)Cβ基因引物，C區(qū)基因引物的5′端插入七個(gè)非模板堿基(GTTTCTT)，Cβ基因引物采用高靈敏度的熒光(6-FAM)標(biāo)記；d.將設(shè)計(jì)的引物和由mRNA合成的cDNA通過兩次PCR反應(yīng)來擴(kuò)增cDNA；e.將經(jīng)過兩次PCR反應(yīng)擴(kuò)增并被熒光標(biāo)記的T細(xì)胞受體基因，與甲酰胺混合后94℃變性，將樣本置于含6％丙烯酰胺的測序凝膠中，在DNA測序機(jī)上運(yùn)行，得到的數(shù)據(jù)用ABIPRISMGeneScan分析軟件進(jìn)行分析和量化，得出藥物療效的評價(jià)結(jié)果。 |
| 摘要 | 發(fā)明提供一種通過設(shè)計(jì)的特定引物來完成PCR反應(yīng)，放大感染HIV病毒的患者的T細(xì)胞受體TCR基因在接受藥物治療前后的變化，進(jìn)而評價(jià)藥物的療效的方法，本發(fā)明提供的技術(shù)不但填補(bǔ)了技術(shù)上的空白而且具有靈敏度高，準(zhǔn)確性好的優(yōu)點(diǎn)。 |
| 國際公布 |
