篩選基因變異和蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA片段的方法
|
公開(公告)號
|
CN1159456C
|
|
公開(公告)日
|
2004.07.28
|
|
申請(專利)號
|
CN00116541.0
|
|
申請日期
|
2000.06.15
|
|
專利名稱
|
篩選基因變異和蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA片段的方法
|
|
主分類號
|
C12Q1/68
|
|
分類號
|
C12Q1/68;C12N15/10
|
|
分案原申請?zhí)? |
|
|
優(yōu)先權(quán)
|
|
|
申請(專利權(quán))人
|
上海交通大學(xué)
|
|
發(fā)明(設(shè)計)人
|
劉建華;林志新;王慶康;劉燕剛
|
|
地址
|
200030 上海市華山路1954號
|
|
頒證日
|
2004.07.28
|
|
國際申請
|
|
|
進(jìn)入國家日期
|
|
|
專利代理機(jī)構(gòu)
|
上海交達(dá)專利事務(wù)所
|
|
代理人
|
王錫麟
|
|
國省代碼
|
上海;31
|
|
主權(quán)項
|
一種篩選基因變異和蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA片段的方法，主要包括制備DNA片段的方法，檢測與蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA片段的方法和鑒定基因變異的方法，其特征在于檢測蛋白質(zhì)結(jié)合DNA片段的方法如下：基因組DNA用限制性內(nèi)切酶酶切或用特異性的引物進(jìn)行的PCR擴(kuò)增制備出包含整個基因組的DNA片段，用特異性基團(tuán)修飾這些DNA片段的末端，使之能夠與相應(yīng)的固相載體表面進(jìn)行共價交聯(lián)，用微陣列點(diǎn)樣設(shè)備將各種DNA片段點(diǎn)樣于固相載體表面并共價交聯(lián)之，制備成DNA芯片，用這種DNA芯片篩選蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA片段的方法是(a)將DNA芯片直接與熒光標(biāo)記的蛋白質(zhì)保溫，芯片的熒光信號位點(diǎn)表示蛋白質(zhì)所結(jié)合的DNA片段；或(b)將DNA片段直接與蛋白質(zhì)保溫，然后用DNase酶切，用同位素或熒光基團(tuán)標(biāo)記被保護(hù)的DNA片段，最后與DNA芯片雜交；或者將被保護(hù)的DNA片段直接與DNA芯片雜交，再用DNA連接酶或RNA連接酶或DNA聚合酶酶促反應(yīng)標(biāo)記與芯片雜交的DNA片段，芯片上的同位素信號或熒光信號表示與蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA片段。
|
|
摘要
|
本發(fā)明主要包括制備DNA片段、檢測與蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA片段和鑒定基因變異的方法。檢測蛋白質(zhì)結(jié)合DNA片段的方法：基因組DNA用內(nèi)切酶酶切或用引物進(jìn)行的PCR擴(kuò)增制備出片段，用基團(tuán)修飾這些DNA片段的末端，使與相應(yīng)的固相載體表面進(jìn)行共價交聯(lián)，用微陣列點(diǎn)樣設(shè)備將各種DNA片段點(diǎn)樣于固相載體表面并共價交聯(lián)之，制備成DNA芯片，用這種DNA芯片篩選蛋白質(zhì)結(jié)合的DNA片段的方法。
|
|
國際公布
|
|
...
評論加載中...
