公開(公告)號 | CN1166684C |
公開(公告)日 | 2004.09.15 |
申請(專利)號 | CN02150919.0 |
申請日期 | 2002.11.28 |
專利名稱 | 制備強熒光藻藍蛋白的方法 |
主分類號 | C07K14/405 |
分類號 | C07K14/405;C07K1/14 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權(quán) | |
申請(專利權(quán))人 | 浙江大學 |
發(fā)明(設(shè)計)人 | 龔興國;曾冬云;徐飛虎;周遠 |
地址 | 310027 浙江省杭州市西湖區(qū)玉古路20號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構(gòu) | 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 |
代理人 | 韓介梅 |
國省代碼 | 浙江;33 |
主權(quán)項 | 制備強熒光藻藍蛋白的方法,其特征是控制溫度在0~4℃下,包括以下步驟:1)新鮮藻泥加入pH值7.0-7.6、濃度50mmol/L、含0.1~0.5mmol/LEDTA的磷酸緩沖液,冰浴超聲波破,將破碎液離心后去沉淀,收集上清液; |
摘要 | 本發(fā)明制備強熒光藻藍蛋白的方法是以新鮮藻泥為原料,用含EDTA的磷酸緩沖液洗滌,經(jīng)超聲波破碎細胞,釋放出色素蛋白,通過離心分離,去除不溶性細胞膜及細胞器。收集上清液,經(jīng)分級鹽析,收集藻藍蛋白沉淀。沉淀溶于含EDTA的磷酸緩沖液中,通過Sephadex G-25脫鹽,上DEAE-Sepharose FF柱,去掉堿性雜質(zhì)蛋白,然后上羥基磷灰石柱,獲得藻藍蛋白洗脫液。接著上CM-Sepharose FF柱,去掉酸性雜質(zhì)蛋白。最后再上第二次羥基磷灰石,獲得高純度強熒光的藻藍蛋白。本發(fā)明既省力又省時,適合工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。 |
國際公布 |