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突變型loxP序列及其應(yīng)用

公開(公告)號(hào) CN1173039C  
公開(公告)日 2004.10.27  
申請(專利)號(hào) CN98812723.7  
申請日期 1998.11.12  
專利名稱 突變型loxP序列及其應(yīng)用  
主分類號(hào) C12N15/66  
分類號(hào) C12N15/66;C12N15/79;C12N5/06;A61K48/00;A01K67/027  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 1997.11.13 JP 331289/1997; 1998.9.28 JP 273150/1998  
申請(專利權(quán))人 住友制藥株式會(huì)社  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 齋藤泉;田中啟二  
地址 日本大阪  
頒證日  
國際申請 PCT/JP1998/005094 1998.11.12  
進(jìn)入國家日期 2000.06.27  
專利代理機(jī)構(gòu) 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會(huì)專利商標(biāo)事務(wù)所  
代理人 隗永良  
國省代碼 日本;JP  
主權(quán)項(xiàng) 具有以下性質(zhì)的突變型loxP序列:(a)由在來自大腸桿菌P1噬菌體的下面的野生型loxP序列中,中央部分的8個(gè)堿基(間隔區(qū))的第2個(gè)(T)、第3個(gè)(G)、第4個(gè)(T)或第5個(gè)(A)堿基中有一個(gè)堿基以及第6個(gè)(T)或第7個(gè)(G)堿基中有一個(gè)堿基被置換為不同的堿基,123456785’-ATAACTTCGTATA ATGTATGC TATACGAAGTTAT-3’間隔區(qū)(b)即使在重組酶Cre存在下與野生型loxP序列之間也不發(fā)生特異性DNA重組反應(yīng),(c)在重組酶Cre存在下,與具有同一序列的另一突變型loxP序列之間能發(fā)生特異性DNA重組反應(yīng)。  
摘要 通過使用本發(fā)明中的具有以下(a)~(c)性質(zhì)的突變型loxP序列,在以動(dòng)物細(xì)胞為首的高等真核細(xì)胞中可以高效地進(jìn)行基因插入或基因置換。(a)由在來自大腸桿菌P1噬菌體的下述的野生型loxP序列中,中央部分的8個(gè)堿基(間隔區(qū))的第2個(gè)(T)、第3個(gè)(G)、第4個(gè)(T)或第5個(gè)(A)堿基中至少有一個(gè)堿基以及第6個(gè)(T)或第7個(gè)(G)堿基中至少有一個(gè)堿基被置換為不同的堿基,而間隔區(qū)以外的區(qū)域即便被任意堿基置換也允許的序列構(gòu)成的序列,(b)即使在重組酶Cre存在下與野生型loxP序列之間也不發(fā)生特異性DNA重組反應(yīng),(c)在重組酶Cre存在下,與具有同一序列的另一突變型loxP序列之間能發(fā)生特異性DNA重組反應(yīng)。123456785’-ATAACTTCGTATA ATGTATGC TATACGAAGTTAT-3’間隔區(qū)  
國際公布 WO1999/025851 日 1999.5.27  
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