| 公開(公告)號 | CN1180080C |
| 公開(公告)日 | 2004.12.15 |
| 申請(專利)號 | CN02110583.9 |
| 申請日期 | 2002.01.18 |
| 專利名稱 | 一種改進(jìn)的肝癌鼠源單克隆抗體的制備方法 |
| 主分類號 | C12N5/18 |
| 分類號 | C12N5/18;C12P21/08;C12Q3/00 |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 中國科學(xué)院上海細(xì)胞生物學(xué)研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 李雋喆;謝弘;褚云芳;來文 |
| 地址 | 200031 上海市岳陽路320號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 上海智信專利代理有限公司 |
| 代理人 | 肖劍南 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項 | 一種改進(jìn)的肝癌鼠源單克隆抗體的制備方法，其特征在于，以改良型DXL無血清培養(yǎng)液為培養(yǎng)基質(zhì)，采用填充床式生物反應(yīng)器，高密度雜交瘤細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)法繼以分離純化制得，其中：所述改良型DXL無血清培養(yǎng)液是在DXL無血清、無蛋白培養(yǎng)液的基礎(chǔ)上，添加了神經(jīng)細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、成纖維細(xì)胞生長因子或胚胎生長因子中的一種或幾種，各種生長因子的含量各為0.01-0.1毫克/升；所述DXL無血清、無蛋白培養(yǎng)液如下：腺嘌呤 0.1-0.5毫克/升丙氨酸 5-10毫克/升氯化鋁 0.0005-0.001毫克/升偏釩酸銨 0.0005-0.001毫克/升精氨酸 100-500毫克/升天冬酰胺 10-50毫克/升天冬氨酸 5-30毫克/升氯化鋇 0.001-0.005毫克/升生物素 0.05-0.5毫克/升氯化鈣 10-100毫克/升氯化膽堿 10-100毫克/升硫酸鉻鉀 0.0005-0.005毫克/升檸檬酸 10-50毫克/升瓜氨酸 1-10毫克/升氯化鈷 0.001-0.005毫克/升硫酸銅 0.001-0.01毫克/升半胱氨酸 10-100毫克/升雙亞油酸卵磷脂 0.1-1毫克/升雙硬脂酸卵磷脂 0.1-1毫克/升乙醇胺 1-10毫克/升乙二胺四乙酸鹽 5-10毫克/升聚乙二醇 0.5-4毫克/升硫酸亞鐵 0.5-5毫克/升原子鐵 2-5毫克/升黃素腺嘌呤二核苷酸 0.01-0.05毫克/升葉酸 1-5毫克/升二氧化鍺 0.0001-0.001毫克/升谷氨酸 10-50毫克/升谷氨酰胺 100-500毫克/升甘氨酸 1-10毫克/升葡萄糖 2000-10000毫克/升組氨酸 10-100毫克/升次黃嘌呤 1-10毫克/升異亮氨酸 100-500毫克/升亮氨酸 100-500毫克/升亞油酸 0.01-0.1毫克/升氯化鋰 5-50毫克/升賴氨酸 50-500毫克/升氯化鎂 50-500毫克/升氯化錳 0.00005-0.0005毫克/升甲硫氨酸 10-50毫克/升鉬酸 0.00005-0.0005毫克/升MOPS 1000-10000毫克/升肌醇 10-50毫克/升煙酰胺 1-10毫克/升硝酸鎳 0.0001-0.0005毫克/升鳥氨酸 1-10毫克/升草酰乙酸 1-10毫克/升泛酸 1-5毫克/升酚紅 1-10毫克/升苯丙氨酸 10-100毫克/升溴化鉀 0.00005-0.0005毫克/升氯化鉀 100-500毫克/升碘化鉀 0.00005-0.0005毫克/升脯氨酸 10-100毫克/升黃體酮 0.001-0.01毫克/升腐胺 0.1-0.5毫克/升吡哆辛 0.1-0.5毫克/升丙酮酸 100-500毫克/升核黃素 0.01-0.05毫克/升氯化銣 0.000005-0.00005毫克/升絲氨酸 10-100毫克/升氯化銀 0.000001-0.0000 1毫克/升氯化鈉 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及一種改進(jìn)的肝癌鼠源單克隆抗體的制備方法，本方法以改良型的DXL無血清培養(yǎng)液為培養(yǎng)基質(zhì)，即在DXL無血清、無蛋白培養(yǎng)液中添加了各種生長因子，如神經(jīng)細(xì)胞生長因子、表皮生長因子、成纖維細(xì)胞生長因子或胚胎生長因子等，含量各為0.01－0.1毫克/升。采用填充床式生物反應(yīng)器高密度雜交瘤細(xì)胞連續(xù)培養(yǎng)，工藝條件是，溫度為30～40℃，轉(zhuǎn)速為300－480RPM，pH為6.8～7.25，PO2為0.5－1.95巴，PCO2為0.5－1.95巴，PN2為0.5－1.95巴，空氣流量為0.1－2/小時、壓力為2－5巴。其細(xì)胞密度高達(dá)108/ml，每升培養(yǎng)液的單克隆抗體的得率達(dá)到1000－1500mg。 |
| 國際公布 |
