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用于高半胱氨酸和胱硫醚的酶促循環(huán)測(cè)定方法

公開(公告)號(hào) CN1612937A  
公開(公告)日 2005.05.04  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN02826808.3  
申請(qǐng)日期 2002.11.06  
專利名稱 用于高半胱酸和胱硫醚的酶促循環(huán)測(cè)定  
主分類號(hào) C12Q1/32  
分類號(hào) C12Q1/32;C12Q1/26;C12Q1/00;G01N33/53  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2001.11.6 US 10/012,762  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 凱奇股份有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 H·K·韋伯;J·歐文斯;R·里德克;D·弗里斯特;M·萊加茲;G·川崎;S·羅森  
地址 美國華盛頓州  
頒證日  
國際申請(qǐng) PCT/US2002/035777 2002.11.6  
進(jìn)入國家日期 2004.07.06  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司  
代理人 周承澤  
國省代碼 美國;US  
主權(quán)項(xiàng) 一種評(píng)估溶液中高半胱氨酸和/或胱硫醚量的酶促循環(huán)測(cè)定,其特征在于,所述測(cè)定包括:(a)含高半胱氨酸和/或胱硫醚的溶液接觸胱硫醚β-合酶或其衍生物、L-絲氨酸和胱硫醚β-裂合酶或其衍生物以形成反應(yīng)混合物,接觸時(shí)間足以催化高半胱氨酸循環(huán)轉(zhuǎn)變成胱硫醚且胱硫醚再轉(zhuǎn)變成高半胱氨酸并產(chǎn)生丙酮酸和氨;(b)確定反應(yīng)混合物中存在的丙酮酸和/或氨的量;(c)在產(chǎn)生的丙酮酸和/或氨量的基礎(chǔ)上評(píng)估溶液中存在的高半胱氨酸和/或胱硫醚的量。  
摘要 本發(fā)明提供酶促循環(huán)測(cè)定用于評(píng)估溶液中高半胱氨酸和/或胱硫醚的量,如血液、血液衍生物或尿。測(cè)定包括步驟:含高半胱氨酸和/或胱硫醚溶液接觸CBS或其衍生物、L-絲氨酸和CBL或其衍生物以形成反應(yīng)混合物,接觸時(shí)間足以催化高半胱氨酸形式循環(huán)轉(zhuǎn)變成胱硫醚且胱硫醚再轉(zhuǎn)變成高半胱氨酸并產(chǎn)生丙酮酸和氨;確定反應(yīng)混合物中存在的高半胱氨酸和/或胱硫醚的量;在形成的丙酮酸和/或氨量的基礎(chǔ)上確定溶液中存在的高半胱氨酸和/或胱硫醚的量。也提供CBS或其衍生物和CBL或其衍生物的表達(dá)載體和分離過程以及進(jìn)行測(cè)定的測(cè)試試劑盒。在較佳實(shí)施方案中,測(cè)定可用最少的酶在15分鐘或更少進(jìn)行中。  
國際公布 WO2003/040694 英 2003.5.15  
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