公開(公告)號(hào)
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CN1207304C
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公開(公告)日
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2005.06.22
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN01142300.5
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申請(qǐng)日期
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2001.09.27
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專利名稱
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分離變性蛋白/包涵體蛋白復(fù)性混合液中蛋白聚集體的方法
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主分類號(hào)
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C07K1/34
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分類號(hào)
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C07K1/34
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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中國科學(xué)院過程工程研究所
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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蘇志國;李明
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地址
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100080 北京市海淀區(qū)中關(guān)村北二條1號(hào)
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頒證日
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國際申請(qǐng)
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海智信專利代理有限公司
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代理人
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高存秀
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國省代碼
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北京;11
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主權(quán)項(xiàng)
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一種分離變性蛋白/包涵體蛋白復(fù)性混合液中蛋白聚集體的方法,其特征在于,首先用含有1-3mol/L變性劑和0.1-0.5mol/L鹽離子的凝膠過濾層析緩沖液平衡凝膠過濾層析柱,再將變性蛋白/包涵體蛋白復(fù)性混合液進(jìn)凝膠過濾層析柱,用該含有變性劑和鹽離子的凝膠過濾層析緩沖液對(duì)其進(jìn)行洗脫,便分離出變性蛋白/包涵體蛋白復(fù)性混合液中的蛋白聚集體;所述的變性劑為脲、鹽酸胍、Triton或SDS;所述的鹽離子來自含有Na+、K+或NH4+離子的鹽酸鹽、醋酸鹽、碳酸鹽、磷酸鹽或硫酸鹽。
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摘要
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本發(fā)明涉及的分離變性蛋白/包涵體蛋白復(fù)性混合液中蛋白聚集體方法,其特征在于,在蛋白復(fù)性工藝過程中,變性的復(fù)性蛋白溶液中含有不同狀態(tài)的蛋白,將含有不同狀態(tài)的蛋白的復(fù)性蛋白溶液利用凝膠過濾層析技術(shù)進(jìn)行凝膠過濾層析分離,并在每升凝膠過濾層析的復(fù)性的緩沖液中加入1~3mol的變性劑和0.1~0.5mol的鹽離子;所述的變性劑為脲、鹽酸胍、Triton或SDS;所述的鹽離子來自含有Na+、K+或NH4+離子的鹽酸鹽、醋酸鹽、碳酸鹽、磷酸鹽或硫酸鹽;其操作簡單,可有效的分離復(fù)性蛋白中的各種形式的成分,提高單一的復(fù)性蛋白純度。
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國際公布
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