網(wǎng)站首頁(yè)
醫(yī)師
藥師
護(hù)士
衛(wèi)生資格
高級(jí)職稱
住院醫(yī)師
畜牧獸醫(yī)
醫(yī)學(xué)考研
醫(yī)學(xué)論文
醫(yī)學(xué)會(huì)議
考試寶典
網(wǎng)校
論壇
招聘
最新更新
網(wǎng)站地圖
您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 >> 藥學(xué)理論 >> 中國(guó)藥品專(zhuān)利文獻(xiàn) >> 正文:rhBACE的表達(dá)純化、活性測(cè)定方法方法及其在藥物篩選中的應(yīng)用專(zhuān)利檢索:專(zhuān)利號(hào)/專(zhuān)利人/發(fā)明人
    

rhBACE的表達(dá)純化、活性測(cè)定方法方法及其在藥物篩選中的應(yīng)用

公開(kāi)(公告)號(hào) CN1706945A  
公開(kāi)(公告)日 2005.12.14  
申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) CN200410055549.7  
申請(qǐng)日期 2004.08.04  
專(zhuān)利名稱 rhBACE的表達(dá)純化、活性測(cè)定方法及其在藥物篩選中的應(yīng)用  
主分類(lèi)號(hào) C12N15/12  
分類(lèi)號(hào) C12N15/12;C12N15/70;C07K14/435;C07K1/14;G01N33/68  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán) 2004.6.4 CN 200410044919.7  
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 南京大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 劉建寧;王石泉;郭志剛  
地址 210093江蘇省南京市漢口路22號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) 南京天華專(zhuān)利代理有限責(zé)任公司  
代理人 夏 平  
國(guó)省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項(xiàng) 一種重組人beta-分泌酶蛋白的表達(dá)純化、活性測(cè)定方法,其特征在于:a.克隆重組人beta-分泌酶蛋白基因,連接到質(zhì)粒表達(dá)載體中,利用大腸桿菌進(jìn)行表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物為beta-分泌酶蛋白;b.表達(dá)產(chǎn)物利用Ni-NTA親和柱進(jìn)行純化;c.純化產(chǎn)物經(jīng)激活后用熒光底物進(jìn)行活性測(cè)定。  
摘要 本發(fā)明涉及重組人beta-分泌酶(簡(jiǎn)稱rhBACE)的制備及活性測(cè)定方法,由此建立了rhBACE抑制劑篩選系統(tǒng)。本發(fā)明將pro-rhBACE克隆到大腸桿菌表達(dá)質(zhì)粒pET28a載體中,構(gòu)建pro-rhBACE-pET28a重組表達(dá)質(zhì)粒并在E.Coli Rosseta中表達(dá)。包涵體中的表達(dá)產(chǎn)物溶于6mol/L鹽酸胍,經(jīng)Ni-Sepharose親和層析純化后,得到高純度的pro-rhBACE蛋白。此蛋白在復(fù)性液中重新折疊后,于酸性條件(pH4.5)下激活,切去酶原序列,產(chǎn)生有活性的rhBACE蛋白。本發(fā)明利用人工合成的熒光17肽底物測(cè)定rhBACE活性。本方法制備的rhBACE可用于開(kāi)展對(duì)阿爾茨海默病發(fā)生機(jī)理的研究及抗阿爾茨海默病藥物的篩選。  
國(guó)際公布  
...
評(píng)論加載中...
網(wǎng) 名: (必填項(xiàng))
評(píng)論內(nèi)容:
關(guān)于我們 - 聯(lián)系我們 -版權(quán)申明 -誠(chéng)聘英才 - 網(wǎng)站地圖 - 醫(yī)學(xué)論壇 - 醫(yī)學(xué)博客 - 網(wǎng)絡(luò)課程 - 幫助
醫(yī)學(xué)全在線 版權(quán)所有© CopyRight 2006-2046, MED126.COM, All Rights Reserved
浙ICP備12017320號(hào)-1
百度大聯(lián)盟認(rèn)證綠色會(huì)員可信網(wǎng)站 中網(wǎng)驗(yàn)證