| 公開(公告)號 | CN1724677A |
| 公開(公告)日 | 2006.01.25 |
| 申請(專利)號 | CN200510084355.4 |
| 申請日期 | 2005.07.19 |
| 專利名稱 | 一種體外培養(yǎng)骨骼肌表達體系 |
| 主分類號 | C12N15/85(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/85(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I;C12N15/65(2006.01)I;C12N15/79(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 北京市腫瘤防治研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 張志謙;宋 琳 |
| 地址 | 100034北京市西城區(qū)大紅羅廠街1號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 北京中北商標專利事務(wù)所有限公司 |
| 代理人 | 吳 立 |
| 國省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項 | 一種體外培養(yǎng)骨骼肌表達體系，主要包括含目的基因的表達載體的構(gòu)建、表達載體轉(zhuǎn)染宿主細胞群及篩選、目的基因在宿主細胞中的表達和表達產(chǎn)物的分離純化、表達產(chǎn)物的活性檢測的步驟，其特征在于所述的表達載體是在pcDNA3.0基礎(chǔ)上，構(gòu)建的帶有myc10檢測標簽及6×his純化標簽的表達載體；且在所述的表達載體中插入人基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)信號序列(見序列1)。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及了一種體外培養(yǎng)骨骼肌表達體系，包括含目的基因的表達載體的構(gòu)建、表達載體轉(zhuǎn)染宿主細胞群及篩選、目的基因在宿主細胞中的表達和表達產(chǎn)物的分離純化等步驟，其特征在于所述的表達載體是在pcDNA3.0基礎(chǔ)上，構(gòu)建的帶有myc10檢測標簽及6×his純化標簽的表達載體；且在所述的表達載體中插入人基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)信號序列。本發(fā)明在表達載體中插入了基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)信號序列，增大了蛋白的分泌量；采用了QM7細胞作為宿主細胞表達蛋白，增大了蛋白的表達量；篩選出適合QM7細胞分化的無血清分化培養(yǎng)基，培養(yǎng)基造價低并且利于后期純化工作，且為PEX作為重組蛋白藥物進行大規(guī)模生產(chǎn)奠定了前期基礎(chǔ)。 |
| 國際公布 |
