| 公開(公告)號 | CN1261581C |
| 公開(公告)日 | 2006.06.28 |
| 申請(專利)號 | CN99806686.9 |
| 申請日期 | 1999.04.14 |
| 專利名稱 | 在原核細(xì)胞有控制地表達重組蛋白質(zhì)的新構(gòu)建體 |
| 主分類號 | C12N15/71(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/71(2006.01)I;C12N9/88(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1998.4.14 FR 98/04638 |
| 申請(專利權(quán))人 | 皮埃爾法博赫藥品公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | L·切瓦萊特;A·羅伯特;J-Y·博納福伊;T·N·蓋因 |
| 地址 | 法國布洛涅-比揚古 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | 1999-04-14 PCT/FR1999/000874 |
| 進入國家日期 | 2000.11.27 |
| 專利代理機構(gòu) | 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標(biāo)事務(wù)所 |
| 代理人 | 陳文平 |
| 國省代碼 | 法國;FR |
| 主權(quán)項 | 生產(chǎn)其基因處于Ptrp色氨酸操縱子啟動子控制下的目標(biāo)重組蛋白的方法，其特征在于它包括如下步驟：a)用載體轉(zhuǎn)化能夠合成能被色氨酸誘導(dǎo)的色氨酸酶的原核宿主細(xì)胞，所述載體包含當(dāng)被導(dǎo)入所述宿主細(xì)胞時能滅活TnaA色氨酸酶編碼基因的核酸序列，并將所述序列整合至所述宿主細(xì)胞的DNA中；并且預(yù)先、隨后或同時將Ptna色氨酸酶操縱子啟動子或其生物學(xué)活性片段的序列導(dǎo)入所述原核細(xì)胞，其中所述Ptna色氨酸酶操縱子或其生物學(xué)活性片段在3’位置后連接著編碼本質(zhì)上是核糖核苷酸或蛋白質(zhì)并對Ptrp啟動子或其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物起抑制作用的分子的核酸序列，所述生物學(xué)活性片段能夠指導(dǎo)或控制位于所述片段下游的基因的表達；b)用含有置于Ptrp色氨酸操縱子啟動子控制下的所述目標(biāo)重組蛋白編碼基因的載體轉(zhuǎn)化所述原核細(xì)胞；c)在允許重組蛋白表達的培養(yǎng)基中培養(yǎng)所述轉(zhuǎn)化細(xì)胞；和d)從培養(yǎng)基或從所述轉(zhuǎn)化細(xì)胞回收重組蛋白，所述方法還在步驟a)和b)之間包括分離和篩選步驟。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及用于在原核宿主細(xì)胞中表達處于Ptrp色氨酸操縱子啟動子控制之下的重組目標(biāo)蛋白編碼基因的新構(gòu)建體。本發(fā)明的特征在于該構(gòu)建體包含當(dāng)導(dǎo)入所述宿主細(xì)胞中時能滅活TnaA色氨酸酶編碼基因的核酸序列。本發(fā)明還涉及含有所述構(gòu)建體的載體和轉(zhuǎn)化了所述載體的宿主細(xì)胞。本發(fā)明還涉及用所述新構(gòu)建體產(chǎn)生所述重組蛋白的方法。 |
| 國際公布 | 1999-10-21 WO1999/053080 法 |
