| 公開(公告)號 | CN100342007C |
| 公開(公告)日 | 2007.10.10 |
| 申請(專利)號 | CN00111627.4 |
| 申請日期 | 2000.01.28 |
| 專利名稱 | 一種新型重組葡激酶及其制備方法 |
| 主分類號 | C12N9/14(2006.01)I |
| 分類號 | C12N9/14(2006.01)I;C12N15/58(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 復(fù)旦大學(xué) |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 宋后燕;宋 鋼 |
| 地址 | 200032上海市醫(yī)學(xué)院路138號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構(gòu) | 上海正旦專利代理有限公司 |
| 代理人 | 包兆宜 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項 | 一種重組突變葡激酶，其特征在于改變野生型葡激酶二聚體結(jié)合面，將野生型葡激酶肽鏈的Lys109-Gly110-Phe111替換為Arg109-Gly110-Asp111，制備重組突變葡激酶。 |
| 摘要 | 本發(fā)明屬生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種低聚合能力兼具防栓功能的新型重組葡激酶(RGD/KGD-Sak)的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和制備方法。根據(jù)對重組葡激酶單體、二聚體三維結(jié)構(gòu)及其生化特性的分析，設(shè)計了新型葡激酶分子結(jié)構(gòu)。通過PCR定點突變構(gòu)建突變體RGD/KGD-Sak基因，然后與原核表達載體pLY-4重組，轉(zhuǎn)化大腸桿菌，篩選高表達工程菌。工程菌經(jīng)發(fā)酵擴增，破碎細(xì)菌，離心收集包涵體，復(fù)性后經(jīng)二步法純化RGD/KGD-Sak。所得產(chǎn)品凍干后，形成聚合體的能力顯著下降，并能顯著抑制ADP誘導(dǎo)的血小板的聚集，具有溶栓、防栓雙重功能。 |
| 國際公布 |
